[KD 검증] 웨스턴 블롯(WB), 면역형광(IF-P), 면역조직화학(IHC-P), ELISA용 Anti-LC3B 토끼 다클로날 항체 - Q9GZQ8

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: LC3B 기능 및 국재화

• LC3B (MAP1LC3B)는 거대오토파지(macroautophagy) 동안 오토파지좀 소포(autophagosomal vacuoles) 형성에 필수적인 유비퀴틴 유형 수정 인자입니다.
  관련 문헌:
  PMID:20418806, PMID:23209295, PMID:28017329

• C-18 세라마이드(ceramides)에 결합하고 손상된 미토콘드리아를 제거하기 위해 오토파지솜(autophagolysosomes)을 미토콘드리아 외막에 고정하여 마이토파지(mitophagy)에서 중요한 역할을 합니다.
  관련 문헌:
  PMID:22922758

• LC3B는 센트리올 위성(centriolar satellites)에서 OFD1을 오토파지 의존적으로 제거함으로써 1차 섬모 형성(primary ciliogenesis)을 촉진합니다.
  관련 문헌:
  PMID:24089205

• 영양 스트레스 시 LC3B는 망상체 포식(reticulophagy) 수용체인 TEX264와 상호작용하여 소포체(ER) 아역역을 오토파지좀으로 리모델링하여 ER의 회전율(turnover)을 돕습니다.
  관련 문헌:
  PMID:31006537, PMID:31006538

• LC3B는 패고포어(phagophore) 막으로 JMY를 직접 모집하여 액틴 핵형성(actin nucleation)과 오토파지좀 생성을 자극합니다.
  관련 문헌:
  PMID:30420355

• LC3s는 주로 패고포어 신장(phagophore elongation)에 관여하는 반면, GABARAP/GATE-16 아패밀리는 오토파지좀 성숙의 후기 단계에서 기능합니다.
  관련 문헌:
  PMID:20418806, PMID:23209295, PMID:28017329

• 세포 내 위치적으로 LC3B는 오토파지좀 막, 미토콘드리아 막, 세포질 소포 및 세포골격에 국재화합니다.

• 조직 발현: 심장, 뇌, 골격근 및 고환에서 가장 풍부하고 간에서는 낮게 발현됩니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 면역원은 사람 LC3B의 N-말단 영역(aa 1–100)에 해당하며, 이는 비공역형(LC3B-I)과 지질화형(LC3B-II) 형태 모두에 존재합니다. 다양한 오토파지 상태에서 결과를 해석할 때 이 설계를 고려하십시오.
• 웨스턴 블롯의 경우 1:500–1:2000의 희석 배율로 시작하는 것이 적합할 수 있으나, 실험 시스템에서 최적화를 권장합니다. LC3B-II가 약간 더 빠르게 이동하는 LC3B-I 및 LC3B-II에 해당하는 두 밴드가 관찰될 것으로 예상됩니다.
• 면역형광(IF-P) 및 면역조직화학(IHC-P)에서는 적절한 대조군(예: 오토파지 유도)을 포함하고, 가능한 경우 녹다운(knockdown) 또는 녹아웃(knockout) 샘플로 신호 특이성을 검증하십시오.
• 이 항체는 쥐 및 랫트 LC3B와 교차 반응성을 나타내므로, 해당 종을 사용할 때 서열 상동성을 확인하고 비인간(non-human) 샘플에서의 성능을 평가하기 위해 파일럿 연구를 수행하는 것을 고려하십시오.

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