WB, IHC-P, ELISA, ChIP용 KD 검증된 Anti-TFEB Rabbit Monoclonal Antibody - P19484

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: TFEB 기능 및 위치

• TFEB (Transcription factor EB)는 Class E basic helix-loop-helix protein 35 (bHLHe35)로도 알려져 있으며, MITF 및 TFE3를 포함하는 basic helix-loop-helix leucine zipper (bHLH-Zip) 전사 인자의 MiT/TFE 아과에 속합니다.
• 라이소좀 및 오토파지 유전자의 프로모터에 있는 CLEAR 모티프(5′-GTCACGTGAC-3′)에 결합함으로써 라이소좀 생합성 및 오토파지의 주요 조절자로 기능합니다. 관련 참고문헌: PMID:19556463, PMID:22692423
• TFEB 활성은 영양분에 민감한 인산화에 의해 엄격하게 조절됩니다: 포만 상태에서, mTOR 매개 다중 세린 잔기 인산화는 TFEB를 세포질에 유지시킵니다; 기아 또는 라이소좀 스트레스는 mTOR를 억제하여 빠른 탈인산화 및 핵 이동을 유도합니다. 관련 참고문헌: PMID:21617040, PMID:22343943, PMID:22576015
• 핵 내에서 TFEB는 자체 또는 다른 MiT/TFE 구성원과 이합체를 형성하여 오토파지, 지질 대사, 에너지 항상성 및 면역 방어에 관여하는 표적 유전자의 전사를 활성화합니다. 관련 참고문헌: PMID:1748288, PMID:29146937
• 또한, TFEB는 T-세포에서 CD40L 발현을 조절함으로써 적응 면역에 역할을 하며, 이타코네이트 매개 알킬화를 통해 항균 선천 면역에도 관여하여 핵 위치 및 라이소좀 생합성을 촉진합니다. 관련 참고문헌: PMID:35662396
• 세포 내 위치는 동적입니다: 인산화 시 주로 세포질에 위치하며, 활성화 시 핵으로 이동합니다; 라이소좀 맥과도 연관될 수 있습니다.

실험 지침 및 기술 팁

• 면역원은 인간 TFEB (NP_009093.1)의 아미노산 50–173에 해당합니다. 이 영역은 N-말단 전사 활성화 도메인 내에 있으며, 인간, 마우스, 래트에서 상대적으로 보존되어 있어 보고된 교차 반응성을 뒷받침합니다. 목록에 없는 종의 경우, 서열 정렬을 권장합니다.
• 웨스턴 블롯의 경우, 차등 인산화 또는 대체 스플라이싱으로 인해 TFEB가 44~53 kDa 사이에서 이중띠로 나타날 수 있습니다; 용해 완충액에 신선한 포스파타제 억제제를 사용하면 인산화 아이소형 보존에 도움이 될 수 있습니다. 이 항체는 녹다운 특이성에 대해 검증되었습니다(KD 검증됨).
• 면역조직화학(IHC-P)의 경우, 조직 유형에 맞게 항원 회복 조건을 최적화해야 합니다. TFEB의 활성화 상태에 따라 핵 및 세포질 염색이 관찰될 수 있습니다.
• ChIP의 경우, 교차결합 및 분쇄 조건이 세포 유형에 맞게 최적화되었는지 확인하십시오; 항체는 CLEAR 또는 E‑box 서열을 포함하는 프로모터 영역을 효율적으로 농축해야 합니다.
• 검정을 설정할 때 적절한 양성 및 음성 대조군(예: TFEB 녹아웃 용해물, 알려진 표적 유전자 위치)을 수행하십시오.

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