[KO 검증 완료] WB, IF, IHC, ELISA용 항-AIF 토끼 다클론 항체 - O95831

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: AIF의 기능과 위치

• AIF는 또한 프로그램화 세포사멸 단백질 8(PDCD8)로도 알려져 있으며, 인간에서 AIFM1 유전자에 의해 암호화됩니다. 대안적 스플라이싱으로 인해 다중 이소폼이 존재하며, 세포사멸 촉진 이소폼과 뇌 특이적 변이체가 포함됩니다.
• AIF는 정상적인 미토콘드리아 대사에서 NADH 산화환원효소로 기능하며, 카스파제 비의존성 세포사멸의 핵심 조절인자입니다. 세포사멸 자극이 가해지면 미토콘드리아 막간 공간에서 세포질과 핵으로 방출되어 염색질 응축과 대규모 DNA 단편화(파르타나토스)를 유발합니다. 관련 참고문헌: PMID:17094969 PMID:20362274 PMID:23217327
• 핵 내에서 AIF는 서열 비의존적 방식으로 DNA에 결합하여 파르타나토스의 특징인 카스파제 비의존적 염색체 DNA 단편화를 유도합니다. 관련 참고문헌: PMID:27178839 PMID:20362274
• AIF는 EIF3G와 상호작용하여 EIF3 번역 기계를 차단함으로써 단백질 합성을 억제하고 카스파제-7을 활성화시켜 세포사멸을 증폭시킵니다. 관련 참고문헌: PMID:17094969
• AIF는 과산화수소 노출에 의해 유도되는 카스파제 비의존성, 픽노틱 세포사멸에서 중요한 역할을 합니다. 관련 참고문헌: PMID:19418225
• 미토콘드리아 항상성에서 AIF는 CHCHD4와 상호작용하고 미토콘드리아로의 수입을 조절함으로써 호흡 사슬 생합성에 참여합니다. 관련 참고문헌: PMID:26004228
• AIF는 정상 조건에서 주로 미토콘드리아 막간 공간과 내막에 위치합니다. 세포사멸 과정에서 세포질, 핵 주변 영역, 핵으로 이동합니다.
• AIF는 뇌(이소폼 5)를 제외한 모든 검사된 인간 조직에서 발현됩니다. 근육, 피부 섬유아세포, 조골세포에서 검출됩니다. 특히 이소폼 5는 다양한 인간 암에서 빈번하게 발현이 감소합니다.

실험 가이드 및 기술 팁

• 면역원은 인간 AIF의 C-말단 영역(aa 334-613)에 해당하므로 여러 스플라이스 변이체를 인식할 수 있습니다. 웨스턴 블롯(WB)과 같은 적용 분야에서는 약 67 kDa 위치에서 밴드가 예상됩니다. 특이성을 확인하기 위해 넉아웃(KO) 검증된 용해물을 사용하는 것을 고려하십시오.
• 면역형광(IF/ICC)의 경우, AIF는 건강한 세포에서 주로 미토콘드리아에 위치하지만 세포사멸 유도 시 핵으로 이동한다는 점에 유의하십시오. 고정 및 투과화 조건은 미토콘드리아와 핵 염색 모두를 보존하도록 최적화해야 합니다.
• 면역조직화학(IHC-P)에서는 에피토프를 노출하기 위해 항원 회수가 필요할 수 있습니다; 표준 구연산염 또는 EDTA 기반 프로토콜을 테스트해 보십시오. AIF를 발현하는 양성 대조군 조직(예: 근육, 피부)에서 검증하십시오.
• ELISA의 경우, 다클론 특성상 샌드위치 형식에서 포획 항체와 검출 항체 모두로 사용할 수 있지만, 단클론 항체와 페어링하면 배경을 감소시킬 수 있습니다.

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