[KO 검증 완료] WB, ELISA용 Anti-ATG4A Rabbit Polyclonal Antibody - Q8WYN0

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: ATG4A 기능 및 국재화

• ATG4A는 ATG8 패밀리 단백질의 단백질 분해 활성화 및 디리피데이션(delipidation)을 매개하여 오토파지에서 중요한 역할을 하는 시스테인 프로테아제입니다. 관련 문헌: PMID:12473658, PMID:15169837, PMID:17347651
• ATG8 단백질(예: MAP1LC3A, GABARAP, GABARAPL2)의 C-말단 아미노산을 절단하여 글리신 잔기를 노출시키며, 이를 통해 포스파티딜에탄올아민(PE)과의 결합 및 막 삽입을 가능하게 합니다. 관련 문헌: PMID:12473658, PMID:15169837, PMID:17347651
• ATG4A는 또한 단백질 결합체(ATG8ylation)에서 ATG8을 제거하는 데유비퀴틴화 유사 효소(deubiquitinating-like enzyme)로 기능하며, 고분자량 부가물을 억제합니다. 관련 문헌: PMID:31315929, PMID:33773106
• PE 결합 ATG8 단백질에 대한 디리피데이션 활성을 나타내며, 이는 거대오토파지(macrophagy) 중 중요한 재활용 단계입니다. 관련 문헌: PMID:29458288, PMID:33909989
• 동족 단백질인 ATG4B와 비교할 때, ATG4A는 더 강력한 디리피데이션 활성을 보이지만 단백질 분해 처리 활성은 더 약합니다. 관련 문헌: PMID:29458288
• 프로테아제 기능 외에도, ATG4A는 ATG9A 운송을 조절하고 ER-포파고포(Phagophore) 접촉을 매개하여 미토파지(mitophagy) 동안 포파고포 성장을 촉진합니다. 관련 문헌: PMID:33773106
• ATG4A는 주로 세포질에 국재합니다.
• 키워드: 대체 스플라이싱(Alternative splicing), 오토파지(autophagy), 가수분해효소(hydrolase), 프로테아제(protease), 단백질 운송(protein transport), 지질 대사(lipid metabolism), Ubl 결합 경로(Ubl conjugation pathway).

실험 가이드 및 기술적 팁

• 면역원은 인간 ATG4A의 C-말단 영역(aa 289-398)에 해당하며, 이는 전장(full-length) 및 잠재적으로 N-말단 부분이 결여된 스플라이스 변이체를 모두 검출하는 데 도움이 될 수 있습니다.
• 웨스턴 블랏의 경우 예상 분자량은 45kDa입니다. 적절한 젤 농도를 확인하고 인간 또는 마우스 세포주의 양성 대조 용해물을 사용하십시오.
• ELISA는 재조합 ATG4A 단백질 또는 펩타이드 코팅을 사용하여 수행할 수 있습니다. 항체 및 항원 농도를 최적화하기 위해 체커보드 적정(checkerboard titration)을 고려하십시오.
• 폴리클로날 항체이므로 로트 간 변동이 발생할 수 있습니다. 의도한 애플리케이션에서 각 새로운 로트를 검증하십시오.
• 녹아웃(KO) 검증은 특이성을 나타냅니다. 밴드 동일성을 확인하기 위해 WB에서 KO 세포 용해물을 음성 대조군으로 포함하십시오.

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