[KO 검증 완료] WB, IF/ICC, IP, ELISA용 Anti-IDH1 토끼 다클론 항체 - O75874

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: IDH1의 기능 및 위치

• IDH1은 세포질 NADP-의존성 이소시트르산 탈수소효소(IDH1)를 암호화하며, IDPc 또는 옥살석시네이트 탈탄산효소로도 알려져 있습니다. 이 효소는 NADPH를 동시에 생성하면서 이소시트르산을 α-케토글루타르산으로 산화적 탈탄산화하는 반응을 촉매합니다 (PubMed:10521434, PubMed:19935646).
  관련 참고문헌: PMID:10521434 PMID:19935646
• 이 효소는 Mg²⁺ 또는 Mn²⁺와 같은 2가 금속 이온을 보조인자로 필요로 하며, 이소시트르산/이소프로필말산 탈수소효소 패밀리에 속합니다. 또한 트리카르복실산 회로와 세포 내 산화환원 항상성에서 중요한 역할을 합니다.
• IDH1은 주로 세포질과 시토졸에 위치하며, 퍼옥시좀에서도 발견됩니다. 퍼옥시좀에서는 피타노일-CoA 다이옥시게나제 활성과 같은 반응에 필요한 NADPH를 공급할 수 있습니다.
• NADPH를 생성함으로써 IDH1은 지질 합성을 포함한 환원적 생합성을 지원하고, 산화 스트레스에 대응하여 세포의 환원 환경을 유지하는 데 도움을 줍니다.
• 이 단백질은 아세틸화 및 인산화를 포함한 번역 후 변형을 받으며, 이러한 변형은 효소 활성과 세포 내 분포를 조절할 수 있습니다.
• IDH1은 각막 상피 크리스탈린으로 기능하여 각막의 투명성 유지에 기여할 가능성이 있습니다(유사성에 근거).
• 성숙한 IDH1 단량체의 계산 분자량은 약 46.7 kDa이며, 이는 웨스턴 블롯에서 약 47 kDa 부근에서 관찰되는 밴드와 일치합니다.

실험 지침 및 기술 팁

• 이 면역원은 인간 IDH1 전장 단백질(aa 1–414)을 포함하므로, 본 항체는 천연 구조와 변성 구조를 모두 인식할 수 있습니다. 웨스턴 블롯에서는 약 47 kDa 부근의 밴드가 예상되며, 본 항체는 KO 검증이 완료되었으므로 적절한 양성 및 음성 대조군을 사용하여 검증해야 합니다.
• 면역침전(IP)에서는 IDH1을 발현하는 조직 또는 세포주의 세포 용해물을 사용하여 표준 프로토콜을 적용하십시오. 다른 항체를 사용한 웨스턴 블롯 또는 질량분석법으로 포획 여부를 확인하십시오.
• 면역형광/면역세포화학(IF/ICC)에서는 퍼옥시좀의 점상 신호가 동반될 수 있는 주로 세포질성 염색 패턴이 예상됩니다. 적절한 고정 및 투과화 조건을 적용하고, 가능하다면 IDH1 녹아웃 대조 세포를 사용하여 특이성을 확인하십시오.
• 이 항체는 마우스 및 랫드 IDH1과 교차 반응하므로 설치류 모델 연구에 적합합니다. 연구 대상의 특정 조직 또는 세포 시스템에서 발현 수준을 항상 검증하십시오.
• ELISA에서는 조합이 맞는 검출 항체와 페어링하거나, 샌드위치 형식에서 본 항체를 포획 및 검출 항체로 모두 사용하는 방법을 고려할 수 있습니다. 이때 다른 이소시트르산 탈수소효소 동형단백질(예: IDH2, IDH3)과의 교차 반응성이 최소화되도록 해야 합니다.

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