[KO 검증 완료] IRF3 토끼 단일클론 항체 - Q14653

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: IRF3의 기능 및 위치

• IRF3는 I형 인터페론(IFN) 의존성 면역 반응의 핵심 전사 조절인자로, DNA 및 RNA 바이러스에 대한 선천면역에서 중요한 역할을 합니다. 인터페론 자극 반응 요소(ISRE)에 결합하여 I형 IFN 유전자(IFN-알파 및 IFN-베타)와 IFN 자극 유전자(ISG)의 전사를 조절합니다. 관련 참고문헌: PMID:22394562 PMID:24049179 PMID:25636800 PMID:11846977 PMID:16846591 PMID:16979567
• 감염되지 않은 세포에서 IRF3는 비활성 형태로 세포질에 존재합니다. 바이러스 감염, 이중가닥 RNA(dsRNA) 또는 톨유사 수용체(TLR) 신호가 발생하면 IKBKE 및 TBK1 키나아제에 의해 인산화됩니다. 이로 인해 구조 변화가 유도되어 이합체화, 핵 내 이동 및 CREBBP와의 결합이 일어나며, dsRNA 활성화 인자 1(DRAF1) 복합체를 형성하고, 이 복합체가 I형 IFN 및 ISG 유전자를 활성화합니다. 관련 참고문헌: PMID:22394562 PMID:25636800 PMID:27302953 PMID:16154084 PMID:33440148
• IRF3는 대식세포에서 서로 다른 유전자 발현 프로그램을 활성화하고 일차 대식세포에서 유의한 세포사멸을 유도할 수 있습니다. 센다이 바이러스 감염에 반응하여 IRF3는 TOMM70:HSP90AA1에 의해 미토콘드리아로 모집되며, 그곳에서 세포사멸 복합체 TOMM70:HSP90AA1:IRF3:BAX를 형성하여 세포사멸을 유도합니다. 관련 참고문헌: PMID:16846591 PMID:25609812
• IRF3는 SARS-CoV-2 감염 중 IFN 반응을 조절하는 핵심 전사인자입니다. 관련 참고문헌: PMID:33440148
• 세포 내 위치는 세포질, 핵 및 미토콘드리아를 포함하며, 이는 신호전달 과정에서의 동적 조절과 일치합니다.
• 번역 후 변형에는 인산화(활성화에 중요), 아세틸화, 이황화 결합 형성, 이소펩타이드 결합 및 Ubl 접합이 포함됩니다.
• 다양한 조직에서 지속적으로 발현되며, 항바이러스 방어에서 광범위한 역할을 한다는 점을 뒷받침합니다.
• 대체 스플라이싱을 통해 여러 아이소폼이 생성되며, 이는 다양한 상황에서 기능을 조절할 가능성이 있습니다.

실험 지침 및 기술 팁

• 면역원은 인간 IRF3(NP_001184051.1)의 아미노산 1-260에 해당하며, DNA 결합 및 조절 도메인을 포함하는 N-말단 영역을 포괄합니다. 이러한 설계는 비인산화 형태와 인산화 형태를 모두 검출할 수 있어 총 IRF3 수준을 모니터링하는 데 적합합니다.
• 웨스턴 블롯의 경우, 인산화에 따른 활성화를 나타내는 밴드 이동을 관찰하기 위해 바이러스 모사체(예: poly(I:C)) 또는 인터페론으로 자극한 세포의 용해물을 사용하는 것을 고려하십시오. 바이러스 감염 세포 또는 TLR 활성화 세포와 같은 관련 샘플 시스템에서 검증하십시오.
• 면역조직화학 및 면역형광에서는 IRF3의 본래 구조를 보존할 수 있도록 항원 회복 및 적절한 고정 방법을 최적화해야 하며, 특히 IRF3가 인산화 의존적으로 핵 내 이동을 일으킨다는 점을 고려해야 합니다.
• 면역침전의 경우, IRF3가 CREBBP 및 TBK1과 같은 파트너 단백질과 복합체를 형성하므로 단백질-단백질 상호작용을 유지할 수 있도록 온화한 용해 조건을 사용하십시오.
• 이 항체는 서열 상동성에 기반하여 마우스 및 랫드 종과도 반응하므로 종간 연구에 사용할 수 있지만, 특정 실험 모델에서의 반응성을 확인하는 것이 권장됩니다.

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