WB, IF/ICC, ELISA용 MAD1/MAD1L1 토끼 다클로날 항체 - Q9Y6D9

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: MAD1 기능 및 국소화

• MAD1L1은 유사 분열 방추체 조립 체크포인트 단백질인 MAD1을 암호화하며, mitotic arrest deficient 1-like protein 1, HsMAD1, hMAD1 및 Tax-binding protein 181로도 알려 불립니다.
• MAD1은 방추체 조립 체크포인트(SAC)의 핵심 구성 요소로, 모든 염색체가 중기판(metaphase plate)에서 방추체 미세소관에 올바르게 부착될 때까지 후기(anaphase) 진입을 방지합니다. 관련 참고문헌: PMID:10049595, PMID:20133940, PMID:29162720
• 부착되지 않은 키네토코어(kinetochores)에서 MAD1은 닫힌 입체 구조의 MAD2L1(C-MAD2)와 이종 사량체 복합체를 형성하고, 열린 MAD2L1(O-MAD2)을 C-MAD2로의 입체 구조 변환을 촉매하여 확산 가능한 "후기 대기(wait-anaphase)" 신호를 생성하는 핵심 단계를 수행합니다. 관련 참고문헌: PMID:10049595, PMID:20133940, PMID:29162720
• 세포질에서 MAD1은 MAD2L1을 격리(sequester)하여 SAC 기능을 손상시키고 간세포암(hepatocellular carcinomas)의 염색체 불안정성에 기여할 수 있습니다.
• 세포 내 국소화에는 핵, 키네토코어, 중심체(centrosomes), 방추극(spindle poles) 및 세포질이 포함되며, 이는 유사 분열 중 역할의 역동성을 반영합니다.
• 조직 특이성: MAD1은 단백질 수준에서 간세포암 및 간종양 세포주(hepatoma cell lines)에서 발현됩니다.
• 번역 후 수정: MAD1은 인산화, 아세틸화 및 유비쿠틴 유사 접합을 거치며, 이는 안정성과 활성을 조절할 수 있습니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 면역원은 사람 MAD1L1의 중앙 영역(aa 360–700)에 해당하므로 전장(full-length) 및 가능한 절단 산물을 모두 인식할 수 있습니다. WB에서 밴드 패턴을 분석할 때 이를 고려하십시오.
• WB의 경우 예상 분자량은 약 83 kDa입니다. HeLa 세포 용해물 또는 기타 활발히 분열하는 세포주와 같은 적절한 양성 대조군을 사용하여 특이성을 확인하십시오.
• IF/ICC의 경우 핵 및 키네토코어에 국소화된 MAD1에 접근하기 위해 투과화(permeabilization)가 필요합니다. 유사 분열 억제 조건(예: 노코다졸 처리) 하에서 관련 샘플 시스템에서 염색을 검증하십시오.
• ELISA 성능은 코팅 버퍼 및 항원 제시에 따라 달라질 수 있습니다. 재조합 MAD1 단백질을 기준으로 사용하는 표준 간접 ELISA 프로토콜을 고려하십시오.

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