WB, ELISA용 MICA 토끼 다클론 항체 - Q29983

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: MICA의 기능 및 세포 내 위치

• MICA(MHC 클래스 I 폴리펩타이드 관련 서열 A)는 MIC-A 또는 PERB11.1로도 알려진 스트레스 유도성 단백질 MIC 계열의 구성원입니다.
• 이는 거의 모든 인간 자연살해(NK) 세포, γδ T 세포 및 CD8+ αβ T 세포에 발현되는 활성화 면역수용체 NKG2D/KLRK1의 리간드로 작용합니다. 관련 참고문헌: PMID:11491531 PMID:11777960
• MICA에 의한 NKG2D 결합은 NK 세포 매개 세포독성과 사이토카인 생성을 촉진하여 선천면역 및 적응면역 반응에서 중추적인 역할을 합니다. 관련 참고문헌: PMID:10426993
• MICA는 바이러스 및 세균 감염, DNA 손상, 열 충격을 포함한 세포 스트레스 상황에서 상향 조절되며, 이를 통해 면역계에 위험 신호로 작용합니다.
• 이 단백질은 주로 세포막에 위치하지만 세포질에서도 발견될 수 있습니다. 중추신경계를 제외한 다양한 조직에 널리 발현되며, 위 상피, 각질형성세포, 내피세포 및 다양한 상피 종양에서 강하게 발현됩니다.
• MICA는 N-결합 글리코실화, 팔미토일화 및 이황화 결합 형성을 포함한 여러 번역 후 변형을 거치며, 면역글로불린 유사 도메인을 포함합니다.
• 대체 스플라이싱을 통해 여러 아이소폼이 생성되며, 단백질은 세포 표면에서 단백질분해적으로 절단되어 면역 반응을 조절하는 가용성 형태를 생성할 수 있습니다.
• MICA는 종양 면역 감시, 자가면역 질환 및 숙주-바이러스 상호작용에 관여하므로 종양학 및 면역학 분야에서 중요한 바이오마커이자 치료 표적입니다.

실험 지침 및 기술 팁

• 사용된 면역원은 인간 MICA의 세포외 도메인에 해당하는 아미노산 24–307(NP_000238.1)을 포함하는 재조합 융합 단백질입니다. 이 영역은 외부로 노출될 것으로 예측되며 천연 에피토프를 제시할 가능성이 있습니다.
• 웨스턴 블롯에서는 환원 조건에서 약 43 kDa 위치에 밴드가 나타날 것으로 예상됩니다. 그러나 글리코실화로 인해 관찰되는 분자량이 약간 더 높을 수 있습니다. 관련 샘플 시스템에서의 검증을 권장합니다.
• ELISA 적용 시 재조합 단백질을 코팅하거나 샌드위치 형식을 사용하는 조건을 최적화해야 합니다. 최적의 항체 및 항원 농도를 결정하기 위해 체커보드 적정을 고려하십시오.
• 이 항체는 인간, 마우스 및 랫드와 교차 반응성을 보이지만, 다른 종에서의 성능은 시험되지 않았으므로 독립적인 검증이 필요합니다.
• WB에서는 일반적으로 5% 탈지유 또는 BSA를 사용한 표준 블로킹이 적용됩니다. 높은 배경이 관찰되면 블로킹제 또는 완충액 조건을 조정해 보십시오.

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