모노메틸 히스톤 H3-K4 토끼 단클론 항체 (Q16695/P68431) - WB, ChIP, IF/ICC 및 후성유전학 연구용

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: 히스톤 H3의 기능과 위치

히스톤 H3는 뉴클레오좀의 핵심 구성 요소로, DNA를 감아 염색질로 압축합니다. 이러한 압축은 DNA를 주형으로 필요로 하는 세포 기계에 대한 DNA 접근성을 제한하므로 전사 조절, DNA 복구, DNA 복제 및 염색체 안정성에서 중심적인 역할을 합니다. DNA 접근성은 히스톤 코드로 알려진 복잡한 히스톤 번역 후 변형 세트와 뉴클레오좀 리모델링을 통해 정교하게 조절됩니다.

히스톤 H3는 핵에 위치하며 염색체의 필수 구성 요소입니다. 여기서 관련된 두 가지 변이체가 있습니다: 표준 히스톤 H3.1 (H3C1, H3C2 등 여러 유전자에 의해 암호화되며 SWISS P68431)은 전신적으로 발현되는 반면, 히스톤 H3.1t (SWISS Q16695)는 정소 특이적입니다. 두 변이체 모두 염색질 구조에서 동일한 기본 역할을 공유합니다.

히스톤 H3의 라이신 4 (H3K4)는 모노-, 디-, 트리메틸화, 아세틸화 등 다양한 번역 후 변형이 일어나는 주요 부위입니다. H3K4의 모노메틸화 (H3K4me1)는 일반적으로 인핸서 영역 및 활성 유전자 전사와 연관되어 있습니다. 본 항체는 H3K4 주변의 모노메틸화 펩타이드를 이용해 생성되었으므로, 해당 변형 상태에 대한 특이성을 제공합니다.

관련 참고문헌: PMID:16267050, PMID:16457588, PMID:17194708.

실험 가이드 및 기술 팁

• 본 항체는 모노메틸화된 H3K4에 특이적입니다. 최적의 결과를 위해 양성 및 음성 대조군 시료 (예: 비변형, 모노-, 디- 또는 트리메틸화된 K4를 가진 펩타이드)를 포함시켜 특이성을 확인하십시오.
• 웨스턴 블롯 (WB): 핵 추출물 또는 전세포 용해물을 사용하십시오. 약 16 kDa 위치에서 밴드가 예상됩니다. 1차 항체의 최적 희석 비율은 경험적으로 결정하십시오 (예: 시작 범위 1:500–1:2000) 적절한 HRP 결합 2차 항체와 함께 사용하십시오.
• 염색질 면역침전 (ChIP): ChIP에 적합합니다. 염색질을 가교결합시킨 후 전단하고 본 항체로 면역침전하십시오. 알려진 H3K4me1 표적 유전자 좌위에서 qPCR로 농축을 검증하십시오.
• 면역형광 (IF/ICC): 세포를 적절하게 고정하고 투과성 처리하십시오. 핵에서만 염색이 나타나는 것을 예상하십시오. DAPI 등으로 대조 염색하여 위치를 확인하십시오.
• IHC-P: 항원 회수가 필요할 수 있습니다; 각 조직 유형에 맞게 조건을 최적화하십시오.
• 닷 블롯 (DB) 및 ELISA: 비특이적 결합을 최소화하기 위해 펩타이드 농도와 차단 조건을 최적화하십시오.
• 교차 반응성: 본 항체는 식물 (애기장대, 벼, 밀)을 포함한 광범위한 종을 인식합니다. 식물 시료의 경우 단단한 세포벽으로 인해 추출 프로토콜을 조정하고 검출 조건을 최적화하십시오.

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