모노메틸-히스톤 H3-R2 토끼 다클론 항체 (Q16695/P68431) | WB, IF/ICC, ELISA

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: 히스톤 H3 (H3.1/H3.1t)의 기능과 위치

• 히스톤 H3는 뉴클레오좀의 핵심 구성 요소로, DNA를 감아 염색질로 압축합니다. 이 과정은 DNA 접근성을 제한하며 전사 조절, DNA 복구, DNA 복제 및 염색체 안정성에 중추적인 역할을 합니다. DNA 접근성은 번역 후 변형(PTM)과 뉴클레오좀 리모델링의 복잡한 집합인 "히스톤 코드"를 통해 조절됩니다.
• 이 단백질은 핵과 염색체에 위치합니다.
• 관련된 두 가지 주요 아이소폼이 있습니다: H3.1 (여러 유전자로 암호화됨, 예: H3C1, H3C2 등, UniProt P68431)은 대부분의 체세포에서 발현되는 반면, H3.1t (H3-4, HIST3H3, UniProt Q16695)는 고환 특이적으로 발현됩니다.
• 히스톤 H3의 N-말단 꼬리는 아세틸화, 메틸화, 인산화, 시트룰린화 등 수많은 번역 후 변형이 일어납니다. 특히 아르기닌 2(R2)는 메틸화될 수 있습니다. 이 위치의 비대칭 이메틸화는 PRMT6에 의해 촉매되며 전사 조절과 관련이 있습니다. R2의 모노메틸화는 중간 단계이며 뚜렷한 기능적 역할을 가질 수 있습니다. 이 항체는 R2의 모노메틸화 형태를 특이적으로 인식합니다. 관련 참고문헌: PMID:17898714, PMID:18077460, PMID:18079182

실험 가이드 및 기술 팁

• 면역원은 인간 히스톤 H3의 R2 주변 합성 모노메틸화 펩티드입니다. 웨스턴 블롯(WB) 수행 시 신호를 증가시키기 위해 핵 추출물 또는 히스톤 농축 분획을 사용하는 것을 고려하십시오. 예측 분자량은 ~15 kDa이지만, 번역 후 변형이나 단백질 상호작용으로 인해 밴드가 약간 높게 나타날 수 있습니다.
• 면역형광/면역세포화학(IF/ICC)의 경우 고정 및 투과화 조건 최적화가 필요할 수 있습니다. 히스톤 H3는 핵 단백질이므로 Triton X-100 또는 메탄올을 이용한 투과화가 권장됩니다. 알려진 핵 마커와 비교하여 염색 패턴을 검증하십시오.
• ELISA에서는 변형되지 않은 형태나 이메틸화 형태 대비 모노메틸 R2에 대한 특이성을 확인하기 위해 메틸 펩티드를 코팅 항원으로 사용하는 것을 고려하십시오.
• 종 교차반응성은 광범위(인간, 마우스, 래트 및 기타)로 예측되지만, 특히 비포유류 종의 경우 관심 있는 특정 샘플 시스템에서 반응성을 확인하는 것이 좋습니다.
• 토끼 다클론 항체로서 중요한 정량 분석의 경우 배치 간 일관성을 평가해야 합니다. 적절한 양성 및 음성 대조군(예: 모노메틸 펩티드 경쟁 실험)을 포함하면 데이터 신뢰성을 높일 수 있습니다.

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