MonoMethyl-Histone H4-R3 Rabbit pAb (P62805) | IF/ICC, ELISA Ready Antibody

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: 히스톤 H4 기능 및 위치

히스톤 H4는 H2A, H2B, H3와 함께 염색질의 기본 반복 단위인 뉴클레오솜을 형성하는 코어 히스톤 단백질 중 하나입니다. 각 뉴클레오솜은 4개의 코어 히스톤 각각 2개씩의 옥타머를 감싸는 147 염기쌍의 DNA로 구성됩니다. 이 구조는 유전체 DNA를 응집시키지만, 동시에 DNA 접근성을 조절하는 동적 플랫폼 역할을 합니다. 히스톤 H4는 전사 조절, DNA 수리, DNA 복제 및 염색체 안정성에 핵심적인 역할을 합니다. 이러한 과정들은 히스톤 꼬리에 대한 광범위한 번역 후 변형들, 즉 "히스톤 코드"라 불리는 것들에 의해 엄격히 조절되며, 이는 뉴클레오솜 리모델링과 효과자 단백질의 모집을 조율합니다.

히스톤 H4는 주로 세포 주기 전체에 걸쳐 염색체와 결합하는 세포핵에 위치합니다. 정자형성 과정에서 아세틸화된 H4는 신장하는 정자세포에서 특이적인 핵 내 위치 패턴을 보입니다.

히스톤 H4의 N-말단 꼬리는 아세틸화, 메틸화, 인산화, 시트룰리네이션 등 다양한 번역 후 변형의 대상이 됩니다. 아르기닌 잔기의 메틸화는 핵심 조절 표지입니다. 아르기닌 3의 단일메틸화(H4R3me1)는 단백질 아르기닌 메틸전이효소에 의해 촉매되며, 전사 조절 및 염색질 상태 형성에 관여하는 것으로 알려져 있습니다.

관련 참고문헌: PMID:11387442, PMID:11448779, PMID:15345777

히스톤 H4의 서열과 변형 패턴은 종 간에 높은 보존성을 보이므로, 효모에서 인간에 이르기까지 광범위하게 유지되어 이 항체의 넓은 교차 반응성을 뒷받침합니다.

실험 지침 및 기술 팁

• 이 항체는 인간 히스톤 H4의 R3 주변 잔기에 해당하는 합성 단일메틸화 펩타이드에 대해 제작되었으므로, H4R3의 단일메틸화 형태를 특이적으로 인식할 것으로 예상됩니다. 연구자들은 펩타이드 경쟁 분석 또는 메틸전이효소 억제제로 처리된 세포주를 사용하여 특이성을 검증하는 것을 고려해야 합니다.
• 면역형광(IF/ICC)의 경우, 4% 파라포름알데히드로 표준 고정 후 0.1–0.5% Triton X-100으로 투과화 처리를 하는 것이 일반적으로 히스톤 검출에 호환됩니다. 신호의 핵 내 위치를 확인하기 위해 핵 대조염색(예: DAPI)을 권장합니다.
• ELISA 응용에서, 이 항체는 합성 단일메틸화 H4R3 펩타이드 또는 세포로부터 추출한 히스톤을 검출하는 데 사용할 수 있습니다. 특정 분석 시스템에 대해 코팅 버퍼와 항체 희석도를 최적화하십시오.
• 이 항체는 서열 보존성이 높기 때문에 인간, 마우스, 래트의 히스톤 H4뿐만 아니라 광범위한 다른 종과도 교차반응할 것으로 예측됩니다. 그러나 교차 반응성은 관련 샘플 시스템에서 실험적으로 검증되어야 합니다.

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