MonoMethyl-YAP1-K342 토끼 다클로날 항체 (P46937) - WB 및 ELISA용

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: YAP1 기능 및 국소화

• YAP1(Yes-associated protein 1)는 전사 활성 보조인자(coactivator) 및 억제 보조인자(corepressor)로 기능하며, Hippo 신호 전달 경로의 핵심적인 하류 효인자로 작용합니다. 이 경로는 세포 증식을 제한하고 세포 사멸(apoptosis)을 촉진하여 장기 크기를 조절하고 발암을 억제하는 데 중요한 역할을 합니다 (PMID:17974916, PMID:18280240, PMID:18579750, PMID:21364637, PMID:30447097). 관련 참고문헌: PMID:17974916, PMID:18280240, PMID:18579750, PMID:21364637, PMID:30447097.
• LATS1/2 키나제에 의한 인산화는 YAP1을 세포질에 가두어 핵 이동과 후속 TEAD 의존성 전사 활성화를 방지합니다. 이 인산화 의존성 조절은 세포 성장, 기질 독립적 성장, 및 상피-간엽 전환(EMT) 제어에 있어 그 역할의 핵심입니다 (PMID:18158288, PMID:26598551, PMID:34404733). 관련 참고문헌: PMID:18158288, PMID:26598551, PMID:34404733.
• YAP1은 다중 세린, 트레오닌, 티로신 잔기에서의 인산화뿐만 아니라 유비퀴틴화 및 메틸화를 포함한 광범위한 번역 후 변형을 받습니다. 리신 342(K342)의 메틸화는 이 항체가 인식하는 특이적 변형입니다. UniProt에서 광범위하게 특성화되지는 않았지만, 이 부위의 메틸화는 YAP1 상호작용이나 안정성에 영향을 미쳐 Hippo 경로 조절의 또 다른 층을 추가할 수 있습니다.
• YAP1의 세포 내 국소화는 역동적으로 조절됩니다. 낮은 세포 밀도에서는 주로 핵에 국소화되고 높은 세포 밀도에서는 세포질로 이동하며, 이 과정은 인산화에 의해 조절됩니다. YAP1은 또한 기계적 자극에 반응하여 밀착 연결(tight junctions) 및 세포막과 결합합니다 (PMID:18158288, PMID:20048001, PMID:31835537, PMID:25849865). 관련 참고문헌: PMID:18158288, PMID:20048001, PMID:31835537, PMID:25849865.
• 조직 특이적 발현 분석 결과, 특정 간암 및 전립선암에서 YAP1 수준이 증가함을 보여주어 그 발암 잠재력을 강조합니다. 또한, 전사 활성 도메인이 결여된 이소폼은 헌팅턴병 환자의 선조체 뉴런에서 검출됩니다 (PMID:16461361, PMID:17974916, PMID:7782338). 관련 참고문헌: PMID:16461361, PMID:17974916, PMID:7782338.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 이 항체는 사람 YAP1의 K342를 둘러싼 잔기에 해당하는 합성 단일 메틸화 펩타이드를 사용하여 제작되었으므로, 메틸화된 형태에 특이적입니다. WB에서 최적의 검출을 위해서는 국소화가 존재량에 영향을 미치므로 YAP1을 농축하기 위해 핵 및 세포질 분획화 프로토콜을 사용하는 것이 좋습니다.
• ELISA를 수행할 때는 특이성을 확인하기 위해 비메틸화 펩타이드 대조군을 포함하십시오. 메틸화 및 비메틸화 펩타이드를 사용한 경쟁 ELISA 방식은 신호 특이성을 검증하는 데 도움이 될 수 있습니다.
• 교차 반응성은 염기 서열 상동성에 기초하여 쥐 및 랫트에 대해 예측되지만, 대규모 실험 전에 관련 조직 또는 세포주에서 반응성을 검증해야 합니다.
• WB의 경우 표준 차단 및 검출 조건이 적합합니다. 그러나 비특이적 밴드가 나타나면 항체 희석 비율(예: 1:500-1:2000)과 차단 버퍼 구성을 최적화하는 것이 좋습니다.

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