NFKB1 Rabbit pAb for WB, IF/ICC, ELISA - P19838

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: NFKB1 기능 및 위치

• NFKB1은 p105 전구체 단백질과 그 프로테아좀에 의한 처리로 생성되는 p50 서브유닛(핵 인자 NF-kappa-B p50)을 암호화합니다. p105는 IκB와 유사한 억제제로 작용하여 NF-κB 이합체를 세포질에 가두는 반면, p50의 생성은 DNA 결합 및 전사 조절을 가능하게 합니다. 관련 참고문헌: PMID:1423592
• 활성화된 p50 서브유닛은 RELA/p65와 결합하여 p65-p50 이종이합체를 형성하며, 이는 표적 유자 인핸서에서 κB 합의 서열 5'-GGRNNYYCC-3'에 결합하는 강력한 전사 활성화 인자입니다. 관련 참고문헌: PMID:1740106, PMID:7830764
• NF-κB 복합체는 일반적으로 IκB 억제제에 의해 세포질에 격리됩니다. 표준적인 활성화 경로는 IκB 키나아제(IKK) 매개 인산화 및 이후의 IκB 프로테아좀 분해를 포함하며, 이는 NF-κB를 방출시켜 핵으로의 이동을 유도합니다.
• NF-κB는 거의 모든 세포 유형에 존재하는 다능성 전사 인자로서, 면역 및 염증 반응뿐만 아니라 세포 생존, 증식, 세포사멸의 중심 매개체 역할을 합니다.
• p50-p50 동종이합체는 BCL3와 결합하지 않는 한 전사 억제제로 기능합니다. BCL3는 이를 활성화제로 전환시킵니다. 따라서, 이합체 구성은 표적 유자 발현을 결정합니다.
• NFKB1은 휴지 상태의 세포에서 주로 세포질에 위치하지만, 활성화 시 신호 반응성 인자로서의 역할과 일치하게 핵으로 이동합니다.
• 인산화, 아세틸화, 유비퀴틴화를 포함한 광범위한 번역 후 변형은 NFKB1의 안정성, DNA 결합 활성 및 전사 출력을 미세 조절합니다.

실험 지침 및 기술 팁

• 면역원(아미노산 41–365)은 p105와 p50 사이에 보존된 N-말단 Rel 상동 도메인 내에 위치합니다. 웨스턴 블롯에서 전체 길이의 p105(~105 kDa)와 처리된 p50(~50 kDa) 밴드가 모두 나타날 수 있습니다. 적절한 세포 추출물 및 처리를 사용하여 밴드 정체성을 확인하십시오.
• 면역형광/ICC의 경우, NFKB1은 기저 조건에서 주로 세포질에 위치합니다. TNF-α 또는 IL-1β로 자극하면 빠른 핵 이동을 유도할 수 있습니다. 세포 내 재분포를 관찰하기 위해 처리되지 않은 대조군을 포함하십시오.
• ELISA 수행 시, 특이성과 민감도를 검증하기 위해 재조합 NFKB1 (p50) 단백질과 짝을 이루는 검출 항체 사용을 고려하십시오. 사용하는 분석 형식에 맞게 코팅 및 차단 조건을 최적화하십시오.
• 폴리클로날 항체로서, 표준 양성 대조군 리세이트 또는 재조합 단백질을 사용하여 로트 간 일관성을 확인해야 합니다.

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