WB, IF/ICC, ELISA용 NLRP3 토끼 다클론 항체 - Q8R4B8

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: NLRP3의 기능 및 세포 내 위치

• NLRP3(NACHT, LRR 및 PYD 도메인 함유 단백질 3, 크라이오피린이라고도 함)는 세포 내 센서로서 NLRP3 인플라마좀의 핵심 구성 요소를 형성합니다. NLRP3 인플라마좀은 세포막 무결성 결함에 대한 반응으로 활성화를 매개하며, 그 결과 IL1B와 IL18의 분비 및 파이롭토시스가 발생합니다. 관련 참고문헌: PMID:19362020, PMID:23582325, PMID:26642356

• NLRP3는 CASP1 및 PYCARD/ASC와 함께 고분자 인플라마좀 복합체 형성을 시작합니다. 이 복합체는 카스파제-1을 활성화하여 pro-IL1B, pro-IL18 및 가스더민-D(GSDMD)를 절단하고, 그 결과 사이토카인 방출과 파이롭토시스성 세포 사멸을 유도합니다. 관련 참고문헌: PMID:16407889, PMID:18403674, PMID:19362020, PMID:16546100, PMID:17008311, PMID:26642356

• 세포 외 ATP, 니제리신, 결정(요산, 콜레스테롤), 아밀로이드-베타 및 입자상 물질(석면, 실리카)을 포함한 다양한 병원체 및 손상 관련 자극은 NLRP3 활성화를 유발하며, 거의 모두 세포 내 K+ 유출로 수렴합니다. 관련 참고문헌: PMID:16407888, PMID:16407889, PMID:16407890, PMID:23809161

• NLRP3 인플라마좀 활성화는 HMGB1 분비에도 필요하며, 건강한 조직을 손상시키지 않고 호중구가 괴사 부위로 이동하도록 유도하는 항상성 상처 치유 반응을 조절합니다. 관련 참고문헌: PMID:22801494, PMID:20947763

• 활성화되면 NLRP3는 미세소관 조직화 중심체(MTOC)로 이동한 다음 분산된 트랜스-골지 네트워크(dTGN) 소낭으로 이동합니다. 이곳에서 포스파티딜이노시톨 4-인산(PtdIns4P)에 결합하여 활성 인플라마좀을 조립하며, 이 과정은 NEK7에 의해 가능해집니다. 관련 참고문헌: PMID:26814970, PMID:34615873, PMID:34861190, PMID:30487600

• NLRP3는 말초 혈액 백혈구(Th2 림프구 및 대식세포)에서 높게 발현되며, 조골세포에서는 낮은 수준으로 발현됩니다. 이는 NLRP3가 면역 및 염증 과정에서 기능한다는 점과 일치합니다. 관련 참고문헌: PMID:15302403, PMID:16546100, PMID:26098997, PMID:28847925, PMID:17907925

• NLRP3는 인플라마좀 골격 기능과 무관하게 Th2 세포에서 전사 조절자로 기능합니다. DNA에 결합하여 Th2 분화와 알레르기성 염증에 중요한 IL4, IL5, IL13 및 기타 유전자의 발현을 조절합니다. 관련 참고문헌: PMID:26098997

• NLRP3는 고유한 ATPase 활성을 보유하며 인산화, 팔미토일화 및 유비퀴틴화 등 다양한 번역 후 변형에 의해 조절됩니다. 이러한 변형은 NLRP3의 활성화 역치와 상호작용을 제어합니다. 관련 참고문헌: PMID:34861190

실험 지침 및 기술적 팁

• 면역원은 마우스 NLRP3의 아미노산 1–93을 포함하며, 이 영역에는 피린(PYD) 도메인이 포함되어 있습니다. 항체가 전장 단백질과 PYD 함유 절편을 모두 검출할 수 있으므로, 사용 중인 모델 시스템에서 특이성을 검증하십시오.
• 웨스턴 블롯의 경우 예측 분자량은 약 118 kDa이지만, 번역 후 변형으로 인해 추가 밴드가 나타날 수 있습니다. 적절한 양성 및 음성 대조군(예: LPS+ATP로 자극한 대식세포 용해물)을 사용하고 고분자량 단백질에 적합하도록 겔 농도를 최적화하십시오.
• 면역형광/면역세포화학(IF/ICC)에서 NLRP3는 활성화 상태에 따라 점상 또는 확산성 염색 양상을 보일 수 있습니다. 본래의 세포 내 위치를 보존할 수 있도록 고정 및 투과화 조건을 최적화해야 합니다.
• ELISA에 적용할 경우 샌드위치 형식을 위해 다른 NLRP3 특이적 항체와의 조합이 필요할 수 있습니다. 다클론 항체의 특성은 포획 또는 검출에 유리할 수 있습니다.

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