PE Rabbit anti-Human NT5E/CD73 단일클론 항체 (유세포 분석용) - P21589

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: NT5E/CD73 기능 및 위치

• NT5E/CD73(ecto-5'-뉴클레오티다아제라고도 함)는 세포막에 GPI로 고정된 단백질로, 세포 외 뉴클레오타이드 일인산을 해당 뉴클레오사이드와 무기 인산염으로 가수분해하는 효소입니다.
• 이 효소는 기질로서 AMP를 선호하지만, IMP, UMP, GMP, CMP 및 dAMP, dCMP, dTMP와 같은 데옥시리보뉴클레오타이드 일인산도 가수분해할 수 있습니다. 관련 참고문헌: PMID:21933152, PMID:22997138, PMID:23142347
• NT5E는 데옥시리보 형태보다 리보뉴클레오타이드 일인산에 대해 선택성을 보입니다. 관련 참고문헌: PMID:34403084
• 이 단백질은 세포막에 위치하여 세포 외 AMP를 강력한 면역억제 대사산물인 아데노신으로 전환함으로써 퓨린성 신호 전달을 조절합니다.
• NT5E는 5'-뉴클레오티다아제 패밀리의 일원이며, 금속 결합 도메인에 의해 나타나듯이 가수분해 활성에 아연 이온이 필요합니다.
• NT5E 유전자의 선택적 스플라이싱은 여러 전사체 변이체를 생성하지만, 모든 아이소형의 기능적 중요성은 완전히 규명되지 않았습니다.
• 번역 후 변형에는 N-연결 글리코실화, 이황화 결합 형성 및 효소를 세포 표면에 고정시키는 GPI 앵커의 첨가가 포함됩니다.

실험 지침 및 기술 팁

• 이 PE-접합 단일클론 항체는 생존한 인간 세포 표면의 CD73를 직접 유세포 분석법으로 검출하도록 설계되었습니다. 세포막 무결성과 최적의 에피토프 제시를 보존하기 위해 세포가 생존해 있는지 확인하십시오.
• 면역원은 세포 외 도메인(a.a. 27-547)에 해당하므로, 이 항체는 투과 처리 없이도 세포 표면에서 접근 가능한 에피토프를 인식할 것으로 예상됩니다.
• 최상의 결과를 얻으려면, 특정 세포 유형과 염색 조건에 대한 최적 농도를 결정하기 위해 항체를 적정하십시오. 일반적으로 1×10^6 세포당 0.1–1 µg이 합리적인 시작 범위입니다.
• 다색 유세포 분석을 수행할 때는 비특이적 결합 및 스펙트럼 중첩을 고려하기 위해 적절한 동형 대조군 및 보상 대조군을 포함하십시오.
• CD73 발현은 세포 활성화에 의해 조절될 수 있습니다. 연구와 관련이 있다면, 휴지 상태와 자극된 샘플 모두에서 이 항체를 검증하는 것을 고려하십시오.

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