유세포 분석용 PE Rat anti-Mouse CD45R/B220 단클론 항체 - P06800 / P08575

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: CD45R/B220 기능 및 국소화

• CD45R/B220은 Ptprc 유전자에 의해 암호화되는 수용체형 티로신 단백질 인산가수분해효소(PTPase)이며, 백혈구 공통 항원(L-CA) 및 림프구 항원 5(Ly-5)라고도 합니다. 주로 B 및 T 림프구를 포함한 조혈 세포에 발현되며, 대안적 스플라이싱에 의해 생성되는 여러 이소형으로 존재합니다.
• 이 단백질은 LYN 및 FYN과 같은 Src 패밀리 키나제의 활성을 조절하여 T 세포 수용체 신호 전달의 중요한 조절자 역할을 합니다. LYN을 인산화시키지 않아(dephosphorylates), DPP4 결합 시 T 세포 활성화 및 공활성화에 필수적인 하류 신호 전달 계에 영향을 미칩니다.
• 항원 제시 세포(APC)–T 세포 면역 시냅스에서 CD45는 미성숙 수지상세포의 CLEC10A와 상호작용하며, 이는 효과 T 세포의 Tn 항원을 운반하는 CD45를 인식합니다. 이러한 상호작용은 T 세포 활성화 임계값을 미세 조정하고 자가반응성 반응을 제한하는 데 도움을 줍니다(유사성에 의함).
• CD45는 두 개의 세포질 내 인산가수분해효소 도메인을 포함합니다: 첫 번째 도메인은 촉매 활성을 나타내고, 두 번째 도메인은 기질 특이성을 조절하는 것으로 보입니다. 세포 외 영역은 고도로 글리코실화되며 리간드 상호작용과 이소형 특이적 기능에 기여합니다.
• 단백질은 주로 세포막에 국소화되며 막 라프트(rafts)와 면역 시냅스에 풍부하여, 항원 결합 후 신호 전달 복합체를 공간적으로 구성합니다.
• 막관통 당단백질이자 단백질 인산가수분해효소 패밀리의 구성원으로서, CD45는 면역 세포 계통의 잘 확립된 마커입니다. B220 이소형은 B 세포와 특이적으로 연관되며 마우스 모델에서 B 세포 집단을 식별하는 데 널리 사용됩니다.
• 인산화 및 글리코실화를 포함한 번역 후 변형은 CD45 효소 활성과 세포 표면 발현을 조절하여 면역 세포 신호 전달 역학에 영향을 미칩니다.
• 주로 림프구 세포에서 연구되었지만, CD45는 다른 백혈구 하위 집단에서도 역할을 수행하여 통합된 선천성 및 적응성 면역 반응에 기여합니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 면역원은 마우스/인간 CD45R/B220의 보존된 영역에서 유래한 합성 펩타이드입니다. 생성된 항체는 마우스 CD45R/B220을 인식하는 것으로 예상되며, 필요한 경우 인간 상동체와의 교차 반응성은 실험적으로 검증해야 합니다.
• 이 항체는 PE(피코에리트린)에 접합되어 있으며, 다색 유세포 분석 패널에 적합한 밝은 형광체입니다. 특정 세포 시스템에서 신호 대 잡음 비를 최적화하고 비특이적 결합을 최소화하기 위해 항체 적정(titration)을 고려하십시오.
• 유세포 분석 응용의 경우, 배경 염색을 줄이기 위해 적절한 생존 염색약과 Fc 수용체 차단 시약을 사용하십시오. B220 양성 B 세포 집단을 검출하기 위해 신선하거나 적절하게 동결 보관된 마우스 림프 조직(비장, 림프절)을 분석하십시오.
• 보고된 분자량 범위(130–144 kDa)는 대안적 스플라이싱과 글리코실화를 반영하므로, 이 제품을 직교 검출 방법(예: 웨스턴 블로팅)으로 적용하는 경우 발현 및 밴드 크기를 확인하십시오. 단, 주로 검증된 응용 분야는 유세포 분석입니다.

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