WB, ELISA, ChIP용 인간 PER2 토끼 단클론 항체 - O15055

주요 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: PER2의 기능과 위치

• PER2(주기 일주기 단백질 상동체 2)는 일주기 시계 단백질 PERIOD 2로도 알려져 있으며, 분자 일주기 시계의 핵심 구성 요소입니다. 유전자 발현에서 약 24시간 주기 리듬을 유도하는 전사/번역 피드백 루프(TTFL) 내에서 전사 억제인자로 기능합니다.
• PER1, CRY1, CRY2와 함께 PER2는 TTFL의 음성 분지를 형성합니다. E-박스 프로모터에서 CLOCK-BMAL1 이량체와 직접 상호작용하여 자기 자신의 발현을 억제하며, 인산화, 아세틸화, 유비퀴틴화 등 번역 후 변형을 통해 일주기 리듬의 주기(tau)를 미세 조정합니다.
• PER2는 여러 방식으로 시계 조절 억제에 기여합니다: 시계 유전자 프로모터에 SIN3-HDAC 크로마틴 재구성 복합체와 H3K9 메틸전이효소(SUV39H1/2)를 모집하며, 3' 종결 부위에서 RNA 결합 단백질 및 헬리카아제와 상호작용하여 전사 종결을 조절합니다.
• 이 단백질은 대사 및 심혈관 조절에 관여합니다. PPARA의 보조활성화인자이자 NR1D1의 보조억제인자로 작용하며, BMAL1, G6PC1 등의 유전자 프로모터에 주기적으로 결합하고 PPARG 매개 지방생성을 억제합니다. 또한 PER2는 대동맥에서 일산화질소와 프로스타글란딘 생성을 조절하고 VGLUT1 발현을 통해 글루타메이트 흡수를 제어합니다.
• PER2의 이대립성 기능 상실 돌연변이는 가족성 진행성 수면 단계 증후군(FASPS)을 유발하며, 이는 일주기 시계를 환경의 명암 주기에 동조화하는 데 PER2가 필수적인 역할을 함을 보여줍니다.
• PER2는 주로 핵에 위치하지만, 세포질, 핵 주변 영역, 핵소체에서도 발견되는데, 이는 동적 이동 및 구획 특이적 기능을 반영합니다.
• 단백질은 널리 발현되며, 골격근과 췌장에서 높은 수준으로 발현되고 폐에서는 낮은 수준으로 발현됩니다. 아이소폼 2는 각질세포에서 특이적으로 검출됩니다.
• 주요 구조적 특징으로는 단백질-단백질 상호작용과 아세포 내 수송에 기여하는 2개의 PAS 도메인과 C-말단 세포질 위치화 도메인이 있습니다.

실험 가이드 및 기술 팁

• 면역원은 인간 PER2(O15055)의 아미노산 1~100번으로 구성된 N-말단 영역으로, 보존성이 높아 전장 길이 단백질과 절단된 아이소폼 모두를 인식하는 항체를 생성합니다.
• 웨스턴 블롯팅(WB)의 경우 약 137 kDa 위치에서 밴드가 예상됩니다; PER2를 발현하는 것으로 알려진 인간 조직 또는 세포주(예: 골격근, 췌장)의 핵 또는 전세포 용해물을 사용하십시오. 내인성 PER2 수준은 일주기 주기에 따라 진동하므로 정의된 자이트게버 시간에 샘플을 수집하는 것을 고려하십시오.
• ELISA 적용의 경우, 겹치지 않는 에피토프를 표적으로 하는 검출 시약과 항체를 결합하면 감도와 특이성을 개선할 수 있습니다; 재조합 PER2 단백질 또는 대조군 세포 용해물을 사용하여 동적 범위를 검증하십시오.
• 크로마틴 면역침전(ChIP)에서 이 항체는 시계 조절 유전자(예: PER1, CRY1)의 E-박스 함유 프로모터 영역을 농축시킬 수 있습니다. 동조화된 시계 조건 하에서 적절한 음성 대조군 영역을 포함하고 qPCR로 농축을 확인하십시오.
• PER2 기능에서 번역 후 변형의 역할을 고려할 때, 인산화 의존적 상호작용이나 위치화를 연구하는 경우 포스파타아제 저해제나 변성 조건을 사용하는 것을 고려하십시오.

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