Phospho-AKT1-T450 + AKT2-T451 + AKT3-T447 Rabbit mAb for WB, IHC-P, ELISA - P31749 / P31751 / Q9Y243

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: AKT 패밀리 기능 및 위치

• AKT 패밀리는 세린/트레오닌-단백질 키나제인 세 가지 밀접하게 관련된 AKT1 (PKB alpha, P31749), AKT2 (PKB beta, P31751), AKT3 (PKB gamma, Q9Y243)로 구성되며, 각각 AKT1, AKT2, AKT3 유전자에 의해 암호화됩니다. 이들은 높은 서열 동원성을 공유하며 중복되지만 독특한 생물학적 역할을 합니다.
• AKT 키나제는 다양한 하류 기질(100개 이상 보고됨)을 인산화함으로써 대사, 증식, 세포 생존, 성장 및 혈관신생을 포함한 다양한 세포 과정을 조절합니다.
  관련 참고문헌: PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:15861136
• 성장 인자 및 PI3K 신호에 의해 활성화되면, AKT는 SLC2A4/GLUT4 전위를 통한 인슐린 유도 포도당 흡수를 매개하고, GSK3 억제를 통해 글리코겐 합성을 촉진하며, mTORC1 경로 활성화를 통해 단백질 합성을 자극합니다.
  관련 참고문헌: PMID:11994271, PMID:12150915, PMID:12172553
• AKT는 MAP3K5/ASK1 및 BAD와 같은 세포사멸 촉진 인자를 인산화 및 불활성화하고, CREB1과 같은 항세포사멸 유전자 발현을 유도하는 전사 인자를 활성화함으로써 세포 생존을 촉진합니다.
  관련 참고문헌: PMID:11154276, PMID:9829964, PMID:10926925
• 세포 내 위치는 세포질, 핵, 세포막 및 미토콘드리아 막간 공간을 포함하여, 구획화된 세포 반응에서의 광범위한 신호 역할을 반영합니다.
• 번역 후 변형, 특히 인산화는 AKT 활성에 중요합니다. 두 가지 핵심 잔기(AKT1의 Thr-308 및 Ser-473)는 완전한 활성화에 필수적이며, 턴 모티프(Thr-450 in AKT1, Thr-451 in AKT2 및 Thr-447 in AKT3에 해당)에서의 인산화는 키나제 안정성 및 단백질 상호작용에 영향을 줄 수 있습니다.
• AKT1은 광범위하게 발현되며, 변화된 발현 및 인산화는 암을 포함한 질병 상태와 연관되어 있습니다; 높은 포스포-AKT 수준은 종종 유방암 및 전립선암에서 관찰됩니다.
• AKT1(UniProt P31749)과 관련된 키워드에는 세포사멸, 탄수화물 대사, 세포막, 세포질, 키나제, 핵, 인산화 단백질, 프로토-온코진, 세린/트레오닌-단백질 키나제 및 번역 조절이 포함됩니다.

실험 지침 및 기술 팁

• 면역원은 인간 AKT1의 Thr-450 영역을 아우르는 합성 인산화 펩타이드입니다; 이 항체는 각각 동등한 부위(T450/T451/T447)에서 인산화되었을 때 AKT1, AKT2 및 AKT3을 인식할 것으로 예상됩니다.
• 웨스턴 블롯의 경우, 인산화를 보존하기 위해 포스파타제 억제제로 리세이트를 제조하십시오; 이소형에 따라 약 48–55 kDa 부근의 밴드가 예상됩니다. 적절한 양성 대조군(예: 성장 인자 처리 세포) 및 음성 대조군(처리하지 않거나 포스파타제 처리 샘플)을 포함하십시오.
• 신호의 포스포-특이성을 확인하기 위해 포스파타제 처리 샘플 또는 비-포스포 펩타이드 차단 대조군 사용을 고려하십시오.
• 면역조직화학(IHC-P)에서는 항원 회복 조건을 최적화하고 염색을 검증하기 위해 양성/음성 조직 대조군을 포함하십시오; 포스포-특이적 신호는 고정 및 처리에 민감할 수 있습니다.
• ELISA의 경우, 적절한 포획/검출 시약과 함께 사용하고, 알려진 농도의 인산화 펩타이드 또는 세포 리세이트를 사용하여 분석법을 검증하십시오.

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