WB, ELISA용 Phospho-AKT1S1/PRAS40-T246 토끼 다클로날 항체 - Q96B36

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: AKT1S1/PRAS40 기능 및 국소화

• AKT1S1(PRAS40, 40 kDa proline-rich AKT substrate로도 알려짐)은 진화적으로 보존된 중심 영양소 센서인 라파마이신 복합체 1(mTORC1)의 기전적 표적(mechanistic target)에 대한 음성 조절 인자로, 대사 반응과 거대 분자 생합성을 자극하여 세포 바이오매스 생성과 성장을 촉진합니다. 관련 참고문헌: PMID:17277771 | PMID:17386266 | PMID:17510057
• 인슐린과 영양소가 없을 때 AKT1S1은 mTORC1 복합체와 결합하고 MTOR 기질 모집 부위를 차단하여 mTORC1 활성을 직접 억제합니다. 관련 참고문헌: PMID:29236692
• 인슐린과 영양소에 반응하여 AKT1S1은 mTORC1에서 분리되며, 이 과정은 인산화 상태와 14-3-3 단백질과의 결합에 의존적입니다. 관련 참고문헌: PMID:17386266 | PMID:18372248 | PMID:16174443
• Thr246(면역원 부위)의 인산화는 14-3-3 결합을 촉진하고 mTORC1 억제를 해제합니다.
• AKT1S1은 주로 세포질과 세포질 용액(cytosol)에 국재합니다.
• 간장과 심장에서 가장 높은 수준으로 널리 발현하며, 정상 세포(예: HEK293)와 비교하여 일부 암세포주(예: A-549, HeLa)에서 발현이 상향됩니다.
• 신경 성장 인자 매개 신경 보호 역할도 할 수 있습니다(By similarity).
• 계산된 분자량이 약 27 kDa(UniProt: 27383 Da)인 인산화 단백질로 분류되며, 대체 스플라이싱을 겪습니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 이 항체는 AKT1S1의 인산화된 Thr246 형태를 특이적으로 검출하며, 비인산화 단백질은 인식하지 않습니다. 인산화 의존적 신호를 확인하기 위해 음성 대조군으로 인산가수처리(Phosphatase-treated) 용해물을 포함하십시오.
• 웨스턴 블로팅의 경우 27 kDa 근처에서 밴드가 예상됩니다. 인산화 상태를 유지하기 위해 용해 버퍼에 인산가수분해 억제제를 사용하십시오.
• ELISA 애플리케이션의 경우 인산화 펩타이드 면역원으로 코팅하는 것을 고려하고, 해당 비인산화 펩타이드에 대한 특이성을 검증하십시오.
• mTORC1 신호 전달을 연구할 때 인슐린이나 성장 인자로 세포를 자극하여 AKT1S1 인산화를 유도하고 mTORC1 복합체로부터의 분리를 모니터링하십시오.
• 실험 시스템에서 항체를 검증하십시오. 인간 암세포주(예: HeLa, A-549)는 더 높은 내인성 발현을 나타내어 검출을 용이하게 할 수 있습니다.

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