Phospho-AMPKα1-S496 Rabbit Monoclonal Antibody for WB, ELISA - Q13131

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: AMPKα1 기능 및 위치

• AMPKα1은 PRKAA1 유전자에 의해 암호화되며, 중심 세포 에너지 센서인 이종삼량체 AMP-활성화 단백질 키나제(AMPK)의 촉매성 알파-1 소단위체입니다.
• 세포 내 낮은 ATP에 반응하여, AMPKα1은 주요 대사 효소와 전사 인자를 인산화하여 동화 과정(지질, 단백질, 탄수화물 합성)을 억제하고 이화 경로를 촉진하여 에너지 항상성을 회복시킵니다. 관련 참고문헌: PMID:17307971, PMID:17712357, PMID:24563466
• AMPKα1은 아세틸-CoA 카르복실라아제(ACACA 및 ACACB), HMG-CoA 환원효소(HMGCR) 및 호르몬 감수성 리파아제(LIPE)를 인산화 및 비활성화함으로써 지질 대사를 직접 조절하여 지방산 및 콜레스테롤 합성을 제어합니다.
• 또한 CRTC2/TORC2를 인산화(세포질 격리 유도)하고 GLUT4의 세포막 이동을 촉진함으로써 포도당 항상성에 중요한 역할을 합니다.
• 대사 외에도, AMPKα1은 TSC2, RPTOR 및 WDR24의 인산화를 통해 mTORC1 경로를 억제하고, ULK1 및 WDR45/WIPI4의 인산화를 통해 자가포식을 활성화하여 세포 성장과 증식을 억제합니다. 관련 참고문헌: PMID:14651849, PMID:18439900, PMID:20160076, PMID:21205641, PMID:28561066, PMID:36732624, PMID:37079666
• 세포 내 위치는 세포질, 세포핵 및 후기 엔도솜을 포함하며, 이는 대사 조절, 유전자 전사 및 엔도솜 신호 전달에서의 역할과 일치합니다.
• AMPKα1은 다양한 잔기에서 인산화에 의해 조절되는 인산단백질입니다; Ser496에서의 인산화가 확인되었으며, 이는 키나아제 활성 또는 위치에 영향을 미칠 수 있습니다.

실험 지침 및 기술 팁

• 인산화 에피토프를 보존하기 위해 세포 용해 및 샘플 준비 시 항상 인산가수분해효소 억제제를 포함하십시오.
• 람다 단백질 인산가수분해효소로 샘플을 처리하거나 면역 인산화 펩타이드로 경쟁 실험을 통해 특이성을 검증하십시오; 신호 소실은 인산화 특이성을 확인합니다.
• 웨스턴 블롯의 경우, 인간 또는 마우스 세포주에서 약 64 kDa 부근의 밴드를 예상하십시오; AICAR, 메트포르민 또는 포도당 결핍에 의한 AMPK 활성화는 검출을 향상시킬 수 있습니다.
• ELISA에서, 인산화 AMPKα1 (S496) 수준을 정량화하기 위해 이 항체를 pan-AMPKα 포획 항체와 함께 사용하는 것을 고려하십시오.

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