Phospho-Chk1-S317 Rabbit Polyclonal Antibody (WB, ELISA) - O14757

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: Chk1 기능 및 국재화

• 세린/트레오닌 단백질 키나제 Chk1 (CHEK1)은 DNA 손상이나 복제 스트레스 시 세포 주기 억제 및 DNA 복구를 매개하여 게놈 무결성을 보장하는 중요한 세포 주기 체크포인트 키나제입니다. 관련 문헌: PMID:11535615, PMID:12399544, PMID:12446774
• Chk1은 CDC25A, CDC25B 및 CDC25C를 인산화하여 14-3-3 결합 또는 프로테아좀 분해를 통해 이를 억제함으로써 CDK-사이클린 활성화를 방지하고 세포 주기 진행을 차단합니다. 관련 문헌: PMID:12676583, PMID:12676925, PMID:12759351, PMID:9278511, PMID:19734889, PMID:20090422
• 또한 RAD51의 Thr-309를 직접 인산화하여 상동 재조합 복구를 촉진하고, TP53의 여러 C-말단 부위를 인산화하여 활성화 및 세포 주기 억제를 강화하며, FANCE를 인산화하여 DNA 가교 복구를 촉진합니다. 관련 문헌: PMID:15665856, PMID:10673501, PMID:15659650, PMID:16511572, PMID:17296736
• Chk1은 TLK1의 Ser-743을 인산화하여 ASF1A 인산화를 방지하고 크로마틴 조립을 강화하며, 복제 포크 유지를 위해 PCNA를 조절합니다. 관련 문헌: PMID:12660173, PMID:12955071, PMID:18451105
• 또한, Chk1은 히스톤 H3.1 (H3T11ph)을 인산화하여 후성유전적으로 유전자를 침묵시키고, RB1을 인산화하여 E2F 상호작용을 촉진하며, SPRTN 및 PABIR1/FAM122A를 표적으로 하여 복제 스트레스와 G2/M 체크포인트를 조절합니다. 관련 문헌: PMID:17380128, PMID:31316063, PMID:33108758
• 내인성 스플라이스 변이체는 전장 Chk1의 억제제로 작용하여 그 기능을 길항하고 S기에서 G2/M기로의 전이를 촉진합니다.
• 세포 내적으로 Chk1은 핵, 염색체, 세포질 및 중심체에 국재하며, 유사분열 중에는 중심체에 농축됩니다.
• 전신적으로 발현되며, 흉선, 고환, 소장 및 결장에서 가장 높은 수준을 보입니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 면역원은 Ser317 주변의 합성 인산화 펩타이드입니다. 이 부위의 내인성 인산화를 보존하려면 샘플 준비 시 인산가수분해효소 억제제를 포함해야 합니다.
• 웨스턴 블로팅의 경우 약 54 kDa에서 특정 밴드가 예상됩니다. 세포 용해물을 람다 인산가수분해효소로 처리하거나 비인산화 특이적 Chk1 항체를 대조군으로 사용하여 특이성을 검증하십시오.
• ELISA에서는 고정화된 펩타이드나 세포 용해물을 사용하고, 인산화 특이성을 확인하기 위해 인산화 및 비인산화 펩타이드로 차단하는 것을 고려하십시오.
• 특정 실험 시스템에 맞게 항체 희석 배율을 최적화하십시오. WB의 일반적인 시작 희석 배율은 1:500–1:2000이지만, 경험적 결정이 권장됩니다.
• 사람 샘플에 대한 교차 반응성은 확인되었습니다. 다른 종의 경우 Ser317 주변의 서열 상동성을 확인하고 실험적으로 테스트하십시오.

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