Phospho-Cyclin E1-T395 Rabbit Polyclonal Antibody for WB, IF/ICC, ELISA - P24864

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: Cyclin E1 기능 및 위치

• Cyclin E1은 G1/S 전환에서 세포 주기 조절에 필수적인 G1/S 특이적 사이클린입니다. 사이클린 의존성 키나제 2 (CDK2)와 복합체를 형성하고 활성화하여 G1기에서 S기로의 진행을 촉진합니다.
• 이것은 사이클린 패밀리에 속하며, 세포 주기 동안 농도가 변동하고 주요 체크포인트를 관장하는 조절 단백질 그룹입니다.
• 이 단백질은 주로 핵에 위치하며, 전사 및 세포 주기 기계 조절 역할과 일치합니다.
• 조직 발현은 고환과 태반에서 가장 높으며, 기관지 상피 세포에서는 낮은 수준으로, 증식하는 조직에서의 기능을 반영합니다.
• 번역 후 변형에는 여러 잔기(예: T395)에서의 인산화, 유비퀴틴화 및 가능성 있는 SUMO화가 포함되며, 이는 단백질 안정성과 활성을 조절합니다.
• 대체 스플라이싱은 별개의 조절 및 가능한 조직 특이적 기능을 가진 아이소형을 생성합니다.
• 계산된 분자량은 약 47,077 Da (UniProt)이며, 웨스턴 블롯에서 관찰된 ~47 kDa 밴드와 일치합니다.
• UniProt 주석은 세포 분열, 사이클린 의존성 키나제 조절 및 프로테오믹스 동정에 관여함을 강조하여 정상 및 암세포 증식에서의 중요성을 부각합니다.

실험 지도 및 기술 팁

• 면역원은 T395 주변의 합성 인산화 펩타이드로, 이 항체가 이 잔기에서 인산화된 Cyclin E1을 특이적으로 검출하는 데 이상적입니다. 인산화 특이성을 확인하기 위해, 샘플을 λ-인산가수분해효소로 처리하거나 비인산화 펩타이드 차단을 사용하는 것을 고려하십시오.
• 웨스턴 블롯에서 약 47 kDa 근처의 밴드가 예상됩니다; 그러나 번역 후 변형이 이동을 변화시킬 수 있으므로 특정 샘플 시스템에서 분자량을 검증하십시오.
• 면역형광/면역세포화학의 경우, 핵 염색을 예상하십시오. 위치를 확인하기 위해 DAPI 또는 다른 핵 대조 염색을 포함시키고, 인산화 에피토프를 보존하기 위해 적절한 고정/투과 조건을 사용하십시오.
• ELISA에 적용할 때, 이 항체는 용해물에서 인산화된 Cyclin E1을 포착하거나 검출할 수 있습니다; 분석 형식에 대한 코팅 및 검출 단계를 최적화하십시오.
• 교차 반응성은 인간, 마우스, 래트에 대해 보고되었습니다; 다른 종을 사용하는 경우, T395 주변의 서열 정렬 및 예비 검증을 수행하십시오.

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