WB 및 ELISA용 Phospho-EGFR-Y869 토끼 다가클로날 항체 - P00533

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: EGFR 기능 및 국재화

• EGFR는 EGF 패밀리 리간드(EGF, TGF-alpha, AREG, epigen, betacellulin, epiregulin, HBEGF 포함)에 결합하는 수용체 티로신 키나제로, 수용체 이량체화 및 자가인산화를 유도합니다. 관련 참고문헌: PMID:10805725 PMID:27153536 PMID:2790960 PMID:12297049 PMID:15611079 PMID:17909029

• 리간드에 의해 활성화된 EGFR는 RAS-RAF-MEK-ERK, PI3 키나제-AKT, PLCgamma-PKC 및 STAT 모듈을 포함한 여러 세포 내 신호 전달 캐스케이드와 NF-kappa-B 신호 전달을 트리거합니다. 관련 참고문헌: PMID:27153536 PMID:11116146

• EGFR는 RGS16(GTPase 활성 증강) 및 MUC1(SRC 및 베타-카테닌과의 상호작용 촉진)과 같은 다른 단백질을 직접 인산화하여, G 단백질 및 세포 부착 경로와 연결됩니다. 관련 참고문헌: PMID:11602604 PMID:11483589

• EGFR는 CCDC88A/GIV와 상호작용하여 세포 이동을 양성 조절하며, 이는 EGFR를 세포막에 유지시키고 신호 전달을 지속시킵니다. 관련 참고문헌: PMID:20462955

• EGFR 유전자(ERBB1, HER1으로도 알려짐)는 ERBB 패밀리에 속하는 수용체 티로신 키나제를 암호화합니다; 대안 스플라이싱 이소형(isoform 2)은 EGF 작용의 길항제로 작용할 수 있으며 난소암에서 발현됩니다.

• EGFR는 주로 세포막에 국재하지만, 소포체(ER), 골지체, 핵막, 엔도솜에서도 검출되며 분비될 수 있습니다.

• EGFR는 키나제 활성을 조절하는 주요 티로신 인산화 부위(Y869 포함)를 가진 인산단백질이며, 글리코실화, 유비퀴틴화 및 기타 번역 후 수정을 겪습니다.

• 사람 조직에 널리 발현됩니다; EGFR는 C형 간염 바이러스(HCV)의 숙주 세포 수용체로 작용하여 간세포로의 바이러스 진입을 촉진합니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 면역원은 사람 EGFR의 Y869 주변 잔기에 해당하는 합성 인산화 펩타이드입니다. 인산화 특이성을 확인하려면 인산가수분해효소 처리 대조군을 포함하거나 비인산화 펩타이드와 경쟁 반응을 수행하십시오.
• 웨스턴 블롯의 경우 EGF 자극 세포 용해물을 사용하고 ~134 kDa에서 밴드를 예상하십시오. 쥐 및 랫트 EGFR와의 교차 반응성이 보고되어 있지만, 관심 종에서 검증이 필요합니다.
• ELISA의 경우 인산화 펩타이드로 코팅하고 차단 및 검출 조건을 최적화하여 신호 대 잡음비를 향상시키는 것이 좋습니다.
• 블롯을 재검출할 때 가혹한 스트리핑 조건은 피하십시오. 이는 인산화 특이 신호를 제거할 수 있습니다.

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