Phospho-eIF4EBP1-T37/T46 Rabbit mAb for WB and ELISA - Q13541

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: eIF4EBP1 기능 및 위치

• eIF4EBP1 (진핵생물 번역 개시 인자 4E-결합 단백질 1), 일명 PHAS-I는 번역 개시의 주요 억제제입니다.
• EIF4G1/EIF4G3과 EIF4E 결합을 경쟁함으로써 EIF4E 활성을 조절합니다. 저인산화 상태에서는 EIF4E에 강하게 결합하여 캡-의존적 번역을 억제합니다. 성장 신호에 반응한 고인산화는 EIF4E로부터의 해리를 유발하여 eIF4F 복합체의 조립과 번역 개시를 허용합니다.
• mTORC1 및 MAP 키나제 경로의 하위 효과기로 작용하여 호르몬, 성장 인자, 영양소에 반응한 단백질 합성을 매개합니다.
• 세포질과 핵 모두에 위치하며, 이는 번역 조절 및 가능한 핵 기능을 조절하는 역할과 일치합니다.
• T37, T46, T70, S65에서의 인산화, 아세틸화, 유비퀴틴화(아이소펩타이드 결합 및 Ubl 접합으로 기재됨)를 포함한 광범위한 번역 후 변형을 거치며, 이는 총체적으로 그 활성과 안정성을 조절합니다.
• 서열에 의해 결정된 분자량은 약 13 kDa (12580 Da)이지만, SDS-PAGE 상에서의 이동도는 인산화 상태에 따라 달라질 수 있습니다.
• 단백질 합성 억제제, 인산단백질로 분류되며 번역 조절 패밀리에 속합니다; 또한 프로테오믹스 연구에서 참조 프로테옴 구성 요소로 확인되었습니다.

실험 지침 및 기술 팁

• 이 항체는 Thr37 및 Thr46에서 인산화된 경우에만 내인성 eIF4EBP1 수준을 인식합니다.
• 웨스턴 블롯의 경우, 인산화 신호를 보존하기 위해 용해 버퍼에 인산가수분해효소 억제제를 포함시키십시오. 주요 밴드는 일반적으로 약 13-20 kDa 근처에서 이동합니다; 차등 인산화로 인해 여러 밴드가 나타날 수 있습니다.
• 인산화를 유도하기 위해 세포를 자극제(예: 인슐린, 혈청)로 처리하고, 선택적으로 인산가수분해효소 처리 또는 비인산화 펩타이드와의 경쟁을 사용하여 포스포-특이성 신호를 검증하십시오.
• ELISA의 경우, 코팅 조건과 항체 농도를 최적화하십시오; 정규화를 위해 총 eIF4EBP1 항체와의 짝을 고려하십시오.
• 교차 반응성은 인간과 랫트에서 입증되었습니다; 마우스의 경우, 서열 상동성에도 불구하고, 교차 반응성 데이터에 반응성이 나열되어 있지 않습니다; 마우스 샘플에서의 검증이 필요할 수 있습니다.

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