Phospho-eIF4EBP1-T45 Rabbit pAb for Western Blot - Q13541

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: eIF4EBP1 기능 및 위치

• 진핵생물 번역 개시 인자 4E-결합 단백질 1 (eIF4EBP1, PHAS-I로도 알려짐)은 캡 의존적 번역 개시의 주요 억제제입니다. 이는 eIF4E-결합 단백질 패밀리에 속하며 eIF4G와 eIF4E에 대한 결합을 경쟁하여 eIF4F 복합체의 조립을 방지합니다.
• eIF4EBP1의 억제제 활성은 인산화 상태에 의해 조절됩니다: 저인산화된 eIF4EBP1은 eIF4E에 강하게 결합하여 번역을 억제하는 반면, 고인산화(예: Thr45 및 다른 부위에서)는 eIF4E로부터의 해리를 유도하여 eIF4F 형성과 번역 개시를 허용합니다.
• eIF4EBP1은 MAP 키나제 및 mTORC1 신호 전달 경로를 통해 호르몬, 성장 인자, 영양소 등 다양한 자극 하류의 단백질 합성 조절을 매개합니다. Thr45에서의 인산화는 순차적 다중 부위 인산화 연쇄 반응에서 중요한 초기 사건입니다.
• 세포 내 위치는 주로 세포질이지만, eIF4EBP1은 핵으로 이동할 수도 있으며, 여기서 추가적인 조절 역할을 할 수 있습니다.
• 번역 후 변형에는 아세틸화, 유비퀴틴화(이소펩타이드 결합 형성) 및 여러 잔기에서의 광범위한 인산화가 포함됩니다. 변형되지 않은 단백질의 계산된 분자량은 약 12.5 kDa이며, SDS-PAGE 상에서의 이동도는 인산화 상태에 따라 주로 13–15 kDa 근처에서 관찰됩니다.
• eIF4EBP1은 널리 발현되며 세포 성장, 증식 및 생존을 조절하는 데 중심적인 역할을 합니다. 그 인산화의 조절 장애는 암 및 대사 장애와 관련이 있습니다.

실험 지침 및 기술 팁

• 사용된 면역원은 Thr45를 포함하는 합성 인산화 펩타이드로, 이 항체가 eIF4EBP1의 인산화된 Thr45 형태를 특이적으로 인식하도록 설계되었음을 나타냅니다. 비인산화된 eIF4EBP1 또는 다른 패밀리 구성원과의 교차 반응성은 가능성은 낮지만 관련 모델 시스템에서 평가해야 합니다.
• 웨스턴 블롯의 경우, 인산화 상태를 보존하기 위해 단백질 리세이트가 인산가수분해효소 억제제 존재 하에 준비되었는지 확인하십시오. 인간 eIF4EBP1의 경우 약 13–15 kDa에서 밴드가 예상되며, 겉보기 분자량은 전체 인산화 수준에 따라 약간 변할 수 있습니다.
• 항체 특이성을 검증하기 위해 적절한 대조군을 포함시키십시오. 예를 들어, 처리하지 않은 대 인산가수분해효소 처리된 리세이트, 또는 조절된 mTORC1 활성을 가진 세포(예: 혈청 기아/인슐린 자극)의 리세이트 등입니다.
• 이 항체의 다른 응용 분야(예: IHC, IF, IP)에서의 성능은 기술되지 않았습니다; WB 이외의 용도로 사용하는 경우 예비 시험이 권장됩니다.

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