Phospho-ERK1-T202 + ERK2-T185 Rabbit Polyclonal Antibody for WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P28482 / P27361

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: ERK1/ERK2 기능 및 위치

• ERK2(MAPK1, p42-MAPK)와 ERK1(MAPK3, p44-MAPK)은 MAPK/ERK 신호전달 캐스케이드의 핵심을 구성하는 두 가지 주요 미토젠 활성화 단백질 키나제로, 세포외 신호를 전달하여 세포 운명을 조절합니다.
• MAPK/ERK 경로는 전사 인자(예: ELK1, FOS, ATF2), 단백질 키나제(예: RSK, MSK, MNK), 세포골격 조절자 등 160개 이상의 하위 기질을 인산화함으로써 증식, 분화, 부착, 생존, 세포사멸을 포함한 광범위한 세포 과정을 제어합니다.
• 활성화되면, ERK1/2는 GLI1을 인산화하여 SUFU로부터의 분리 및 핵 이동을 촉진함으로써 스무든 신호전달을 양성 조절합니다.
  관련 참고문헌: PMID:35831023
• 저산소증에 반응하여, ERK2는 포스포글리세레이트 키나제 PGK1을 인산화하여 미토콘드리아로 유도하고 피루브산으로부터의 아세틸-CoA 생성을 억제합니다.
  관련 참고문헌: PMID:26942675
• 이 키나제는 세포질, 핵, 세포골격(방추체, 중심체), 초점 접착부, 막 소포(caveolae) 등 여러 세포내 구획에 위치하여 상황에 따른 신호전달을 가능하게 합니다.
• 활성화는 상류 MEK 키나제에 의한 Thr-Glu-Tyr 모티프(ERK2의 T185 및 Y187; ERK1의 T202 및 Y204)의 이중 인산화를 필요로 합니다; 이 항체는 특이적으로 인산화된 T185(ERK2) 및 T202(ERK1)를 검출합니다.
• 키나제 활성 외에도, ERK2는 촉매 활성과 무관하게 GC-풍부 프로모터 요소에 결합하여 인터페론 반응 유전자를 조절함으로써 전사 억제자로도 기능합니다.
• 키워드: 아세틸화, 선택적 스플라이싱, 세포사멸, ATP 결합, 세포 주기, 세포 접합부, 세포질, 세포골격, DNA 결합, 숙주-바이러스 상호작용, 키나제, 막, 뉴클레오티드 결합, 핵, 인산화 단백질, 억제자, 세린/트레오닌 단백질 키나제, 전사, 전사 조절, 유비쿼틴 유사 접합.

실험 지침 및 기술 팁

• 시료 준비 중 인산화를 보존하려면, 용해 버퍼에 포스파타제 억제제를 포함시키고 상온에서 장시간 시료를 처리하지 않도록 합니다.
• 람다 단백질 포스파타제로 세포 용해물을 처리하여 항체 특이성을 검증하십시오; 웨스턴 블롯에서 신호가 완전히 소실될 것으로 예상됩니다.
• IHC-P에서, 항원 검색 조건(예: 시트르산 완충액 pH 6.0)을 최적화하고, 낮은 농도의 인산화 표적 검출을 향상시키기 위해 포스포 특이적 신호 증폭 프로토콜 사용을 고려하십시오.
• IF/ICC의 경우, 포름알데히드로 세포를 고정하고 메탄올로 투과화하십시오; 자극 시 예상되는 위치에 기초하여 알려진 세포내 마커(예: 핵 DAPI, 골지체 마커)와의 공동 위치를 확인하십시오.
• 예상 밴드: ERK1/ERK2 이소형에 대해 ~38–43 kDa; 인산화 상태 또는 스플라이스 변이체로 인해 여러 밴드가 나타날 수 있습니다.

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