WB, IP, IF/ICC, ELISA용 Phospho-Histone H2AX-S139 토끼 단일클론항체 - P16104

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: 히스톤 H2AX의 기능 및 위치

• 히스톤 H2AX (H2A.X)는 뉴클레오솜의 일부에서 기존 H2A를 대체하는 히스톤 H2A 변이체입니다.
• DNA를 염색질로 압축하고 번역 후 변형을 통해 DNA 접근성을 조절함으로써 전사 조절, DNA 복구, DNA 복제 및 염색체 안정성에서 중심적인 역할을 합니다.
• Ser139에서의 인산화(γ-H2AX)는 DNA 이중 가닥 절단(DSB)을 인식하고 DNA 복구 기전을 모집하는 데 필수적이며, DNA 손상의 핵심 지표가 됩니다.
• 저선량 전리 방사선에 반응하여 체크포인트 매개 세포 주기 정지를 유도하고 효율적인 DSB 복구를 수행하는 데 필요합니다.
• 핵에 위치하며 염색체와 연관되어 있습니다.
• 아세틸화, 인산화, 유비퀴틴화를 포함한 다중 번역 후 변형의 대상이 되며, 이는 DNA 손상 반응에서 그 기능을 미세하게 조절합니다.
• H2AX (H2AFX) 유전자는 히스톤 H2A 유전자 계열의 구성원이며 널리 보존되어 있습니다.
• 예상 분자량은 약 15 kDa이며, 이는 SDS-PAGE에서의 일반적인 이동 패턴과 일치합니다.

실험 지침 및 기술 팁

• 면역원은 인간 히스톤 H2AX의 S139 주변 합성 인산화 펩타이드입니다. 인산화 특이적 검출을 위해 샘플 준비 시 포스파타제 억제제(phosphatase inhibitors)를 포함하는 것을 고려하십시오.
• 인산화 형태에 대한 항체의 특이성을 검증하려면 처리되지 않은 용해물과 포스파타제 처리 용해물의 신호를 비교하십시오.
• Western blot에서는 약 15 kDa 부근의 밴드가 예상되므로 적절한 분자량 마커를 사용하십시오.
• 면역형광법에서 γ-H2AX 초점(foci)은 DNA 이중 가닥 절단의 고전적인 지표입니다. 신호를 강화하기 위해 에토포사이드(etoposide)나 전리 방사선과 같은 제제로 DNA 손상을 유도하는 것을 고려하십시오.
• ELISA의 경우, 코팅 항원으로 인산화 펩타이드를 사용하고, 음성 대조군으로 비인산화 펩타이드를 사용하십시오.

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