WB, ELISA용 인산화 히스톤 H3-T3 토끼 다클로날 항체 - Q16695 / P68431

주요 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: 히스톤 H3 기능 및 국재화

• 히스톤 H3.1t(H3/g 또는 H3.4로도 지정됨)은 정형(canonical) 히스톤 H3의 고환 특이적 변이체입니다. 이는 H3-4 (HIST3H3) 유전자에 의해 암호화되며 HIST1H3A를 포함한 광범위한 히스톤 H3 패밀리에 속합니다.
• 코어 히스톤으로서 H3는 H2A, H2B 및 H4와 함께 히스톤 옥타머를 조립하여 크로마틴의 기본 반복 단위인 뉴클레오솜을 형성합니다. 뉴클레오솜은 DNA를 유전 정보에 대한 접근을 제한하는 응축된 구조로 패키징합니다.
• 이러한 응축은 전사, DNA 복제, DNA 복구 및 전체적인 염색체 안정성을 조절하는 데 중심적인 역할을 합니다. 뉴클레오솜의 제어된 언래핑(unwrapping) 또는 리모델링을 통해 세포 기계가 DNA 템플릿을 읽고, 복사하거나 복구할 수 있게 됩니다.
• 히스톤 기능은 N-말단 꼬리 부위의 복잡한 번역 후 변형 배열인 "히스톤 코드"에 의해 동적으로 조절됩니다. 여기에는 인산화(예: Thr-3), 아세틸화, 메틸화 및 기타 다양한 변형이 포함되며, 이들은 함께 작용하여 크로마틴 상태를 조절하고 하류 효과 단백질을 모집합니다.
• H3.1t는 핵에만 국재하며 크로마틴에 통합됩니다. DNA 패키징 역할과 일치하게 세포 주기 내내 염색체와 밀접하게 결합되어 있습니다.
• H3.1t의 발현은 주로 고환 세포로 제한되어 있으며, 이는 정자 형성 동안 크로마틴 재구성에서의 특수한 기능을 시사합니다. 다른 H3 변이체들은 더 광범위하게 발현되며 체세포에서 유사한 뉴클레오솜 역할을 수행합니다.
• H3.1t에 대한 UniProt 키워드에는 "인산단백질(Phosphoprotein)", "아세틸화(Acetylation)", "메틸화(Methylation)", "시트룰리네이션(Citrullination)", "ADP-리보실화(ADP‑ribosylation)"가 포함되어 있으며, 이는 그 기능을 조절하는 광범위한 변형 환경을 강조합니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 면역원은 사람 HIST1H3A의 Thr-3을 포함하는 합성 인산화 펩타이드입니다. 이 설계는 히스톤 H3의 인산화 형태를 특이적으로 인식하는 항체를 생성하는 것을 목표로 합니다. 연구자는 인산가수분해효소 처리 샘플과 미처리 샘플 간의 신호를 비교하여 특이성을 확인해야 합니다.
• 이 항체는 웨스턴 블로팅(WB) 및 ELISA에 대해 검증되었습니다. WB의 경우 전체 세포 용해물 또는 히스톤이 풍부한 추출물을 사용할 수 있으며 15 kDa 근처의 밴드가 예상됩니다. 이동(migration)은 H3의 변형 상태에 따라 달라질 수 있습니다. 인산화 신호를 유지하려면 용해 및 샘플 준비 과정에서 항상 인산가수분해효소 억제제를 포함하십시오.
• ELISA의 경우 인산화 펩타이드 또는 인산화 히스톤 단백질로 플레이트를 코팅하는 것을 고려하십시오. 결합 특이성을 평가하기 위해 적절한 대조군(예: 비인산화 펩타이드)을 포함하십시오.
• 척추동물에서 H3 N-말단 꼬리의 높은 보존성으로 인해 예상되는 교차 반응성은 넓습니다(사람, 쥐, 랫트 등). 그러나 정량적 적용 전 관련 종 및 조직에서의 검증이 권장됩니다.
• 면역조직화학적 또는 면역세포화학적 적용의 경우, 이 항체는 원래 이 형식용으로 개발되지 않았음을 참고하십시오. 적절한 항원 회복 및 검출 조건을 사용한 파일럿 테스트가 권장됩니다.

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