Phospho-IRE1-S724 Rabbit pAb - O75460

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: IRE1 기능 및 위치

• IRE1(ERN1, IRE1α로도 알려짐)은 이중 기능 세린/트레오닌-단백질 키나제 및 엔도리보뉴클레아제로, 소포체 비접힌 단백질 반응(UPR)의 주요 센서 역할을 합니다. 관련 참고문헌: PMID:11175748, PMID:11779464, PMID:12637535
• 스트레스를 받지 않은 세포에서 IRE1은 ER 샤페론 HSPA5/BiP에 결합함으로써 비활성 단량체 상태로 유지됩니다. 관련 참고문헌: PMID:21317875
• 잘못 접힌 단백질이 축적되면 HSPA5/BiP가 분리되어 IRE1의 동종 이량체화 및 키나제 도메인의 트랜스-자가인산화를 허용하며, 이는 엔도리보뉴클레아제 기능을 활성화합니다. 관련 참고문헌: PMID:21317875
• 엔도리보뉴클레아제 도메인은 특이적으로 XBP1 mRNA를 절단하여 26-뉴클레오타이드 인트론을 제거하고 접합된 XBP1(XBP1s)을 생성합니다. 관련 참고문헌: PMID:11779464, PMID:21317875, PMID:24508390
• XBP1s는 강력한 전사 인자를 암호화하며, 이 인자는 ER 단백질 접기, 품질 관리 및 분해에 관여하는 유전자의 발현을 상향 조절하여 ER 항상성을 회복시킵니다. 관련 참고문헌: PMID:11779464, PMID:21317875, PMID:24508390
• XBP1 접합 외에도 IRE1은 GORASP2 및 SEC16A를 통한 CFTR의 ER 스트레스 유도 세포막 이동과 같은 비전통적 단백질 분비 경로도 조절합니다. 관련 참고문헌: PMID:21884936, PMID:28067262
• IRE1은 유비쿼터스하게 발현되며, 특히 췌장 조직에서 높은 수준으로 발현되는데, 이는 췌장 세포의 높은 분비 수요를 반영합니다.
• 소포체 막 단백질로서 IRE1의 N-말단 루미널 도메인은 ER 스트레스를 감지하는 반면, 세포질 C-말단 영역은 키나제 및 엔도리보뉴클레아제 활성을 보유하고 있습니다.

실험 지침 및 기술 팁

• 이 항체는 인간 IRE1α의 S724 부위에 해당하는 인산화 펩타이드에 대해 제작되었습니다. 인산화 특이성을 확인하려면 Western blot 분석 전에 샘플을 λ-포스파타제로 처리하는 것을 고려하십시오.
• WB의 경우 IRE1은 약 110 kDa에서 이동합니다. 밴드 신원을 확인하기 위해 철저한 멤브레인 차단을 보장하고 적절한 양성(ER 스트레스 세포 용해물) 및 음성(스트레스 없는 세포) 대조군을 포함시키십시오.
• IHC-P의 경우, 항원 검색 조건 최적화가 필요할 수 있습니다. 아이소타입 대조군을 포함시키고 알려진 IRE1 조직 분포에 대한 염색 패턴을 검증하십시오.
• 쥐 및 랫드 IRE1과의 교차 반응성이 보고되었으나, 이 종들에서의 보존성을 확인하기 위해 S724 주변의 에피토프 서열 정렬을 권장합니다.
• 토끼 폴리클로날 항체로서, 로트 간 성능이 다를 수 있습니다. 일관성을 보장하기 위해 특정 분석 시스템에서 각 새 로트를 검증하십시오.

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