Phospho-NF-κB p65/RelA (Ser468) 토끼 다가클로날 항체 (WB, ELISA용) - Q04206

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: NF-κB p65/RelA 기능 및 국재화

• NF-κB p65(RelA, NFKB3라고도 함)은 NF-κB 전사 인자 복합체의 서브유닛으로, RELA, RELB, REL, NFKB1/p105 및 NFKB2/p52를 포함하는 Rel 상동성 도메인(Rel homology domain) 함유 단백질 군에 속합니다.
• 정형적인(canonical) NF-κB 이량체인 RELA-NFKB1은 κB DNA 부위에 결합하여 염증, 면역, 세포 성장, 분화 및 세포 사멸과 관련된 유전자를 활성화합니다.
• p65/RelA는 활성화 이량체(예: RELA-NFKB1)와 동량체(RELA-RELA)를 모두 형성하며, 후자는 인바신(invasin) 매개 IL-8 발현에 관여합니다.
• 세포 내 국재화는 비활성 상태에서 주로 세포질에 위치하며 IκB 억제제에 결합되어 있습니다. 활성화되면 핵으로 이동하여 전사를 조절합니다.
• p65는 인산화, 아세틸화, 메틸화, 유비퀴틴화 및 S-니트로실화를 포함한 광범위한 번역 후 변형의 대상이 되며, 이는 그 활성과 안정성을 조절합니다.
• Ser468(및 다른 잔기)에서의 인산화는 전사 활동과 단백질 상호작용의 미세 조정(fine-tuning)에 관련된 것으로 알려져 있습니다.
• RelA는 T-세포 사이토카인 유전자 발현에 필수적입니다. 관련 참고문헌: PMID:15790681
• SARS-CoV-2 감염 중 인터페론 반응에서 핵심 전사 인자로 작용합니다. 관련 참고문헌: PMID:33440148

실험 가이드 및 기술적 팁

• 이 항체는 Ser468 주변의 합성 인산화 펩타이드에 대해 생성되었으므로, p65/RelA의 인산화 형태를 특이적으로 인식합니다. 정확한 검출을 위해 용해 및 세척 완충액에 인산가수분해 효소 억제제를 포함시키십시오.
• 인산화 특이성을 확인하려면 람다 단백질 인산가수분해효소(lambda protein phosphatase)로 샘플을 처리하고 WB로 밴드 신호를 비교하십시오. 신호 소실은 인산화 의존성을 나타냅니다.
• WB의 경우 환원 조건에서 SDS-PAGE를 수행하고 적절한 대조군(예: NF-κB 활성화가 알려진 처리되지 않은 대조군과 자극된 세포 용해물)을 사용하십시오.
• ELISA의 경우 이 항체는 포효(capture) 또는 검출(detection) 시약으로 사용할 수 있습니다. 샌드위치 ELISA를 위해 비인산화 특이적 p65 항체와의 짝(pairing)을 검증하십시오.
• 명시된 대로 쥐 샘플과의 교차 반응성을 고려하십시오. 단, 귀하의 특정 실험 모델에서 검증이 필요합니다.

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