WB 및 ELISA용 Phospho-PKA RIIα (PRKAR2A)-S99 Rabbit mAb - P13861

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: PRKAR2A 기능 및 국소화

• PRKAR2A는 cAMP 의존성 단백질 키나제 II형 알파 조절 소단위를 암호화하며, 이는 세포가 cAMP에 반응하는 방식을 조절하는 PKA 홀로효소의 핵심 구성 요소입니다.
• PKA의 조절 소단위로서 cAMP에 결합하여 촉매 소단위의 분리 및 활성화를 유도하며, 활성화된 촉매 소단위는 대사, 유전자 발현 및 세포 증식에 관여하는 하류 타겟을 인산화합니다.
• II형 조절 소단위는 A-키나즈 앵커링 단백질(AKAPs, MAP2 키나제 포함)에 결합하여 막 결합을 매개하며, 이를 통해 PKA 활성을 특정 세포 내 소기관으로 국소화합니다.
• 사람 게놈에는 4가지 조절 소단위 유형(I-alpha, I-beta, II-alpha, II-beta)이 포함되어 있습니다. PRKAR2A는 II-alpha 클래스에 속하며, 조직에 따라 발현이 달라져 일부에서는 구성적이고 다른 일부에서는 유도됩니다.
• PRKAR2A는 주로 세포질에 국소화되며 앵커링 단백질과의 상호작용을 통해 세포막과 결합할 수 있어, cAMP 신호 전달의 공간적 조절을 가능하게 합니다.
• 이 단백질은 활성, 안정성 또는 파트너와의 상호작용을 조절하는 다중 부위(예: Ser99) 인산화 및 아세틸화를 포함한 번역 후 변형을 겪습니다.
• 대안 스플라이싱은 서로 다른 이소형을 생성하며, 이 단백질은 인산단백질(Phosphoprotein), 아세틸화(Acetylation), cAMP 결합 등의 키워드로 분류되어 역동적인 조절 역할을 반영합니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 면역원은 Ser99 주변의 합성 인산화 펩타이드입니다. 처리된 샘플과 처리되지 않은 샘플 간의 신호를 비교하거나 비인산화 펩타이드 차단 대조군을 사용하여 인산화 특이성을 검증해 보십시오.
• 웨스턴 블로팅의 경우 46 kDa 근처의 밴드가 예상됩니다. 내인성 발현은 다를 수 있으므로 관련 샘플 시스템에서 차단 및 항체 희석 배율을 최적화하십시오.
• ELISA의 경우 이 항체를 사용하여 세포 또는 조직 용해물에서 인산화된 PRKAR2A를 검출합니다. 검정 특이성을 확인하기 위해 적절한 양성 및 음성 대조군을 포함하십시오.
• 사람 및 쥐에 대한 교차 반응성이 확인되었습니다. 마우스 샘플을 사용하는 경우 잠재적인 서열 차이로 인해 실험적으로 교차 반응성을 검증해야 합니다.
• 신호 전달에서 PKA의 중요한 역할로 인해 Ser99의 인산화는 역동적일 수 있습니다. 실험을 설계할 때 cAMP 경로를 자극하거나 억제하는 것을 고려하십시오.

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