WB 및 ELISA용 Phospho-PLN-S16 Rabbit pAb - P26678

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: 포스포람반(Phospholamban) 기능 및 국소화

• 포스포람반(PLN)은 심장 근소포체(Sarcoplasmic reticulum)의 SERCA2 Ca2+-ATPase의 겉보기 Ca2+ 친화도를 낮춤으로써 가역적으로 억제하는 6.1 kDa 막투과성 인산단백질로, 이를 통해 심장 수축력 및 이완을 조절합니다 (PubMed:28890335). 관련 참고문헌: PMID:28890335
• PLN은 주로 낮은 이완기 Ca2+ 농도에서 우세한 SERCA2의 ATP 결합 E1 형태(E1 conformation)를 선호적으로 결합하며, ATP에 의한 알로스테릭 활성화를 방해하여 이완기 동안 Ca2+ 재흡수를 지연시킵니다.
• SERCA2 외에도 PLN은 SERCA3를 억제하며, 긴 정자(elongated spermatids) 및 시상망상핵(thalamic reticular nucleus)의 칼슘 항상성에 관여하는 것으로 알려져 있어, 생식 세포 분화 및 수면/각성 행동에 잠재적으로 영향을 미칠 수 있습니다.
• PLN의 세린 16 (및 트레오닌 17) 인산화는 PKA 및 CaMKII와 같은 단백질 키나제에 의해 일어나며, SERCA2 억제를 역전시켜 β-아드레날린 신호 전달 및 심장 수축력 조절의 중요한 조절 노드 역할을 합니다.
• 세포 내에서 PLN은 근소포체/소포체 막 및 미토콘드리아 막에 위치하며, 칼슘 처리 세포 소기관에서 조절 기능을 고정합니다.
• PLN은 주로 심장 근육에서 발현되며, PLN의 돌연변이는 확장형 심근병증(CMD1P) 및 비후형 심근병증(CMH18)을 포함한 유전성 심근병증을 유발합니다.
• 이 단백질은 팔미토일화(palmitoylation), 아세틸화(acetylation), 인산화를 포함한 여러 공유 결합 수정을 거치며, 이는 올리고머 상태, 막 고정 및 조절 활동에 영향을 미칩니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 면역원은 인간 PLN의 세린 16 주변 잔기에 해당하는 합성 인산화 펩타이드입니다. 이 설계는 인산화 에피토프를 인식하는 항체를 풍부하게 합니다. ELISA 및 웨스턴 블랏의 경우, 인산화 특이성을 확인하기 위해 음성 대조군으로 비인산화 펩타이드나 인산가수분해효소(Phosphatase) 처리된 용해물을 사용하는 것이 좋습니다.
• PLN의 분자량이 낮기 때문에(~6 kDa), 표준 SDS-PAGE 조건에서는 단백질이 효율적으로 분해되지 않을 수 있습니다. 웨스턴 블랏 검출을 위해 높은 백분율 겔(예: 15–20%) 또는 Tricine-SDS-PAGE를 사용하는 것이 권장됩니다.
• 표시된 대로 이 항체는 마우스 및 랫트 PLN과 교차 반응합니다. PLN은 심장에서 고발현되므로, 해당 종의 심장 조직 용해물에서 내인성 인산화 PLN 검출을 검증해야 합니다.
• ELISA의 경우, 토끼 다클로날(polyclonal) 특성으로 인해 민감한 포획/검출이 가능할 수 있습니다. 그러나 정량 분석의 경우 로트 간 일관성을 검증해야 합니다.
• PLN 인산화는 역동적으로 조절되므로, 인산-S16 신호를 유지하기 위해 인산가수분해효소 억제제를 포함한 적절한 샘플 준비가 필수적입니다.

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