WB, IHC-P, ELISA용 Phospho-RB-S795 토끼 단일클론 항체 - P06400

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: 망막모세포종 관련 단백질(Retinoblastoma-associated protein) 기능 및 국재화

• 망막모세포종 관련 단백질(RB1, pRb, p105-Rb, p110-RB1, pp110으로도 알려짐)은 사람의 RB1 유전자에 의해 암호화된 종양 억제 단백질입니다.
• RB1은 세포 주기의 G1/S 전이를 조절하는 핵심 인자입니다. 저인산화 상태에서는 E2F 전사 인자에 결합하여 이를 억제함으로써 S기 진입에 필요한 유전자의 전사를 억제합니다. 관련 참고문헌: PMID:10499802
• 사이클린 의존성 인산화 효소(CDK)에 의한 RB1의 인산화는 E2F와의 상호작용을 방해하여 전사 억제를 해제하고 세포 주기 진행을 허용합니다. 관련 참고문헌: PMID:10499802
• RB1은 또한 CDK3/cyclin-C에 의한 인산화를 통해 G0-G1 전이를 촉진하며, 이는 세포 주기 진입과 퇴출에서의 조절 역할을 더욱 강조합니다. 관련 참고문헌: PMID:15084261
• 세포 내에서 RB1은 주로 핵에 존재하지만 세포질에서도 발견될 수 있으며, 이는 전사 조절 및 크로마틴 조직화 기능과 일치합니다.
• RB1은 히스톤 메틸전이효소(예: SUV39H1, KMT5B, KMT5C) 및 히스톤 탈아세틸화효소를 모집하여 헤테로크로마틴 형성과 후성유전적 침묵에 관여하며, 크로마틴 구조를 유지합니다.
• 조직 발현에는 망막 및 포피 포피세포(foreskin keratinocytes)가 포함되며, 여기서 RB1 단백질이 검출되었습니다.
• 또한 RB1은 SV40 대형 T 항원, HPV E7 및 아데노바이러스 E1A와 같은 바이러스 발암 단백질의 표적이 되며, 이들은 바이러스 복제를 촉진하기 위해 RB1-E2F 복합체를 방해합니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 항원은 사람 RB의 Ser795 주변 잔기에 해당하는 합성 인산화 펩타이드입니다. 특이성을 평가할 때 인산화 비특이 RB 항체나 인산가수분해효소(phosphatase) 처리된 샘플의 신호와 비교하는 것을 고려하십시오.
• 웨스턴 블로팅의 경우 RB1은 큰 단백질(약 106 kDa)이므로, 적절한 전이 조건을 보장하고 분자량 확인을 위해 프리스테인드 마커를 사용하십시오.
• 면역조직화학(IHC-P)에서 항원 회복 및 차단 단계는 염색에 영향을 미칠 수 있으므로, 특정 조직 시스템에서 이러한 매개변수를 최적화하십시오.
• 이 항체는 쥐 및 래트 RB1과 교차 반응성을 나타내므로 설치류 세포주나 조직을 포함하는 연구에 사용할 수 있습니다. 그러나 모델에서 발현 수준과 인산화 상태를 검증해야 합니다.
• ELISA 적용의 경우 코팅 버퍼에서 인산화 에피토프가 보존되도록 하고, 차단제가 인산화 특이적 결합을 방해하지 않도록 하십시오.

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