Phospho-Smad2 (S245/S250/S255) Rabbit mAb for WB and ELISA - Q15796

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: SMAD2 기능 및 위치

• SMAD2 (Mothers against decapentaplegic homolog 2)는 수용체-조절 SMAD (R-SMAD)로서, TGF-베타 (변형 성장 인자) 및 액티빈 타입 1 수용체 키나제에 대한 세포내 신호 전달체 및 전사 조절자로 기능합니다.
• C-말단 SXS 모티프 (세린 잔기 465 및 467)에서 인산화되면, SMAD2는 SMAD4와 복합체를 형성하고 핵으로 이동하여 표적 유전자 프로모터의 TGF-베타 반응 요소 (TRE)에 결합하여 전사를 조절합니다.
• SMAD2는 억제성 14-3-3 단백질 YWHAQ로부터의 분리를 자극하여 PDPK1 키나제 활성을 양성 조절합니다.
• 대장암에서 종양 억제자로 연루되어 있습니다. 관련 참고문헌: PMID:8752209
• 세포내 소기관 수준에서, SMAD2는 신호 전달에서의 역할과 일치하게 세포질과 핵 사이를 왕복합니다.
• 이 단백질은 골격근, 내피 세포, 심장 및 태반에서 높은 수준으로 발현됩니다.
• 번역 후 변형에는 인산화, 아세틸화 및 유비퀴틴화가 포함되며, 이는 그 활성, 안정성 및 상호작용을 조절합니다.
• 대체 스플라이싱은 여러 이소형을 생성하며, 이 단백질은 DNA 결합을 매개하는 아연 이온 결합 도메인 (MH1 도메인)을 포함합니다.

실험 지침 및 기술 팁

• 이 항체는 인산화된 펩타이드에 대해 생성되었습니다; 샘플 용해 버퍼에는 준비 과정 중 인산화 상태를 유지하기 위해 인산가수분해효소 억제제 (예: 소듐 오르토바나데이트, 소듐 플루오라이드)가 포함되어야 합니다.
• 웨스턴 블롯의 경우, 활성화 의존적 밴드 이동을 확인하기 위해 처리되지 않은 세포 용해물과 TGF-β/액티빈으로 자극된 세포 용해물을 모두 실행하는 것을 고려하십시오.
• WB에 권장되는 시작 희석 배율은 1:500–1:2000이지만, 최적 농도는 특정 샘플 시스템에서 경험적으로 결정해야 합니다.
• ELISA에서, 낮은 인산가수분해효소 활성을 가진 차단 버퍼를 사용하면 배경을 줄일 수 있습니다; 특이성을 검증하기 위해 인산화 펩타이드 경쟁 분석을 고려하십시오.
• 토끼 단일클론 항체로서, 검출을 위해 HRP 또는 AP에 접합된 항-토끼 IgG (H+L) 이차 항체를 사용하십시오.

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