Phospho-Smad2-S465/S467 + Smad3-S423/S425 Rabbit mAb (WB, ELISA 용) - Q15796/P84022

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: SMAD2 기능 및 위치

• SMAD2 (Mothers against decapentaplegic homolog 2)는 MADH2 또는 MADR2로도 알려져 있으며, TGF-베타 및 액티빈 타입 1 수용체 키나제를 위한 세포 내 신호 변환체 역할을 하는 수용체 조절 SMAD(R-SMAD)입니다.
• 리간드 결합 시, SMAD2는 C-말단 세린 잔기 S465/S467에서 인산화되어 SMAD4와 복합체를 형성하고 핵으로 이동하며, 여기서 TRE 요소에 결합하여 유전자 전사를 조절합니다.
• 이는 주요 음성 조절자인 14-3-3 단백질 YWHAQ로부터의 해리를 촉진하여 PDPK1 키나제 활성을 양성으로 조절합니다.
• SMAD2는 대장암에서 종양 억제인자로 기능할 수 있습니다. 관련 참고문헌: PMID:8752209
• 세포 내 소기관 수준에서 SMAD2는 세포질과 핵 모두에 위치하며, 인산화 상태에 의해 제어되는 동적 셔틀링을 보입니다.
• 조직 발현은 골격근, 내피 세포, 심장, 태반에서 두드러집니다.
• 인산화, 아세틸화, 유비퀴틴화를 포함한 번역 후 변형은 SMAD2의 활성과 안정성을 미세 조정합니다.
• 이 항체는 TGF-베타 신호 전달에서 활성화에 중요한 SMAD2의 S465/S467 및 SMAD3의 상동 부위 S423/S425의 이중 인산화를 검출합니다.

실험 지침 및 기술 팁

• 이 토끼 단일클론항체는 인간 SMAD2의 S465/S467 주변 합성 인산화 펩타이드에 대해 제작되어 활성화된 인산화 상태에 대한 특이성을 보장합니다.
• 웨스턴 블롯의 경우, 표적 인산화를 보존하기 위해 용해 버퍼에 인산가수분해효소 억제제를 포함시키십시오. 예상 주요 밴드: ~52 kDa (SMAD2) 및 ~48 kDa (SMAD3); ~25, 35, 43 kDa의 추가 밴드는 분해 생성물 또는 이소형을 나타낼 수 있습니다. 특이성은 인산가수분해효소 처리 대조군 또는 siRNA 녹다운으로 확인하십시오.
• ELISA의 경우, 팬 항체를 사용하여 인산화 신호를 총 SMAD2/3 수준으로 정규화하는 것을 고려하고; 실험 조건은 경험적으로 최적화하십시오.
• 인간, 마우스, 래트 단백질과의 교차 반응성이 관찰되었습니다; 적절한 TGF-베타 자극을 통해 실험 시스템 내 내인성 인산화 수준을 확인하십시오.

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