WB, ELISA용 Phospho-TBC1D4-S588 Rabbit pAb - O60343

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: TBC1D4 기능 및 국소화

• TBC1D4는 AS160 (Akt substrate of 160 kDa)라고도 불리며, RAB2A, RAB8A, RAB10 및 RAB14를 포함한 Rab 단백질에 대한 GTPase-activating protein (GAP)으로 기능하는 다중 도메인 단백질입니다.
• TBC1D4의 이소형 2(Isoform 2)는 인슐린 자극에 의한 GLUT4의 세포막으로의 전위(translocation)에서 중요한 역할을 하며, 이를 통해 지방세포와 골격근 세포의 포도당 흡수를 증가시킵니다.
• TBC1D4는 여러 인산화 부위를 가진 인산화 단백질입니다. Ser588에서의 인산화는 인슐린 신호 전달과 관련이 있으며 GAP 활성과 14-3-3 단백질과의 상호작용을 조절합니다.
• 이 단백질은 광범위하게 발현되며, 이소형 1은 골격근과 심장에서 높게 발현되고, 이소형 2는 부신, 갑상선, 폐, 신장, 결장, 뇌 및 지방 조직에 풍부합니다.
• 췌장 섬(islets)에서 TBC1D4 발현은 제2형 당뇨병 환자에서 감소하며, 이는 당뇨병의 병태 생리학과 연결됩니다.
• 세포 내에서 TBC1D4는 주로 세포질에 국소화하며, 소포(vesicles) 및 신호 전달 구성 요소와 상호작용합니다.
• 추가적인 번역 후 수정(post-translational modifications)으로는 아세틸화와 메틸화가 포함되며, 이는 기능을 추가로 조절할 수 있습니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 웨스턴 블롯(WB)의 경우, 인산화 의존적 검출을 검증하기 위해 인슐린으로 자극한 세포와 자극하지 않은 세포의 전체 세포 용해물(whole-cell lysates)을 사용하는 것이 좋습니다. 샘플 준비 중 인산가인산화효소 억제제(phosphatase inhibitors)를 포함하십시오.
• 높은 분자량(~147 kDa) 때문에, 효율적인 검출을 위해 적절한 젤 농도와 전달 조건(transfer conditions)을 사용하십시오. 분자량 마커로 밴드 크기를 확인하십시오.
• ELISA에서 이 항체는 인산화 펩타이드 검출에 활용될 수 있습니다. 특이성을 확인하기 위해 비인산화 펩타이드 대조군을 포함하십시오.
• 이 항체는 사람, 쥐, 랫트 TBC1D4와 교차 반응합니다. 조직 특이적 발현 프로필을 염두에 두고 관련 종 및 조직 문맥에서 검증하십시오.
• 토끼 유래 다클로날 항체(polyclonal antibody)이므로, 로트(lot) 간 일관성이 다를 수 있습니다. 새로운 로트로 교체할 때 재검증을 고려하십시오.

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