Rabbit anti-Human CD146 단일클론항체 (유세포분석용) - P43121

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: CD146 기능 및 위치

• CD146(별칭 MUC18 또는 MCAM)는 면역글로불린 슈퍼패밀리에 속하는 세포 표면 당단백질로, MCAM 유전자(GeneID: 4162)에 의해 암호화됩니다. 선택적 스플라이싱에 의해 여러 이소형이 생성됩니다.
• 칼슘 비의존적 세포 접착을 매개하며, 혈관 조직에서 세포간 접합부의 내피 단층의 무결성에 기여합니다.
• 흑색종에서 CD146 발현은 종양 세포가 혈관 내피와 상호작용할 수 있게 하여 혈행성 전파 및 전이를 촉진하는 것으로 생각됩니다.
• 이 단백질은 표면 수용체로 기능하며, 리간드 결합은 FYN 및 PTK2/FAK1의 티로신 인산화와 세포 내 칼슘 농도의 일시적 상승을 유발합니다.
• 발생 과정에서 CD146은 신경능선 세포의 이동을 안내하는 접착 분자로 작용할 수 있습니다.
• 면역 국소화 연구는 CD146이 세포막에 위치함을 보여주며, 세포 외 영역에는 면역글로불린 유사 도메인, N-연결 당화 부위, 이황화 결합이 포함되어 있고, 세포질 꼬리는 인산화를 겪습니다.
• 예측된 분자량은 약 71.6 kDa이지만, 성숙한 당화된 단백질은 SDS-PAGE에서 57–71 kDa 밴드로 이동합니다.
• 정상 성인 조직에서 CD146은 평활근 세포와 내피 세포로 제한되지만, 진행성 원발성 흑색종 및 전이 병변에서 강력하게 상향 조절되어 종양 진행의 표지자가 됩니다.

실험 지침 및 기술 팁

• 면역원(aa 24-559)은 인간 CD146의 전체 세포 외 도메인을 포함하므로, 이 항체는 살아 있고 고정되지 않은 세포에서 자연 상태의 세포 표면 단백질을 인식할 것으로 예상됩니다. 이는 유세포분석 적용에 있어 중요한 요구사항입니다.
• 유세포분석에서 양성 및 음성 군집을 명확하게 구분하는 최적의 농도를 확립하기 위해 항체를 적정하십시오.
• 분석에서 죽은 세포를 제외하기 위해 적절한 동형 대조군, 단일색 보상 대조군 및 생존력 염색을 항상 포함시키십시오.
• 잘 알려진 CD146 발현 세포주(예: A375 흑색종) 또는 MCAM이 상향 조절되는 것으로 알려진 원발성 종양 샘플에서 염색을 검증하십시오.
• 은 빛에 민감한 형광물질이므로, 접합체를 빛으로부터 보호하여 보관하고, 반복적인 냉동-해동 주기를 피하며, 사용 전에 응집체를 제거하기 위해 간단히 원심분리하십시오.

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