Rabbit anti-Human CD28 Monoclonal Antibody for Flow Cytometry - P10747

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: CD28 기능 및 국소화

• CD28은 T세포 특이적 표면 당단백질로, T세포 활성화, 증식, 생존 및 면역 항상성 유지에 필수적인 공동 자극 수용체 역할을 합니다. 관련 문헌: PMID:1650475 PMID:7568038
• CD80 또는 CD86 리간드와 결합하면, CD28은 TCR 신호를 증폭하고 T세포 유전자 발현을 재프로그래밍하는 고유한 세포 내 신호를 전달하여 CD4+ 및 CD8+ T세포 아형 모두에서 증식과 사이토카인(특히 IL-2) 생성을 증가시킵니다. 관련 문헌: PMID:12196291 PMID:24665965 PMID:35397202
• 리간드 결합은 단백질 키나제 C-세타(PRKCQ) 및 GRB2의 모집을 유발하여 PI3K/Akt 의존적 및 비의존적 경로를 통해 NF-kappa-B를 활성화합니다. 이는 TCR/CD3 및 CD40L 공동 자극과 함께 작용하여 IL-4 및 IL-10 생성을 향상시킵니다. 관련 문헌: PMID:21964608 PMID:24665965 PMID:7568038 PMID:8617933
• CD28은 또한 T세포에서 CD40L 매개 NF-kappa-B 활성화 및 키나제 MAPK8과 PAK2의 활성을 증강시킵니다. 관련 문헌: PMID:15067037
• T세포와 형질세포의 표면에 발현되는 CD28은 면역글로불린 슈퍼패밀리에 속하며, 단일 Ig 유사 V형 도메인, 트랜스맴브레인 영역, 그리고 활성화 시 인산화되는 세포질 꼬리를 포함합니다.
• 번역 후 수정(post-translational modifications)에는 N-결합 글리코실화와 티로신 잔기의 인산화가 포함되며, 이는 신호 전달에 중요합니다.
• 성숙 단백질의 계산된 분자량은 약 25 kDa (25066 Da)이며, 이는 웨스턴 블로팅 및 유세포 분석 애플리케이션에서의 검출 결과와 일치합니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 이 항체는 전장 재조합 인간 CD28 단백질(P10747)에 대해 생성되었습니다. 유세포 분석(FC)에서 성능이 검증되었으나, 다른 애플리케이션의 경우 사용자가 개별적인 최적화를 수행해야 합니다.
• FC의 경우, 관련 샘플 시스템에서 최적의 염색 농도를 결정하기 위해 항체를 적정(titrate)하고, 비특이적 결합을 최소화하기 위해 적절한 아이소타입 대조군(isotype controls)과 Fc 차단 단계를 포함하십시오.
• CD28은 활성화 시 빠르게 내재화(internalization)되므로, 활성화된 T세포를 연구하는 경우 표면 염색을 4°C에서 수행하거나 대사 억제제를 사용하여 리간드 유도성 내재화를 방지하는 것을 고려하십시오.
• 과잉의 재조합 CD28 단백질과 항체를 미리 배양하여 특이적 염색을 차단함으로써 표적 특이성을 확인하십시오.

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