Rabbit anti-Human CD33 Monoclonal Antibody for Flow Cytometry - P20138

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: CD33 기능 및 국재화

• 골수세포 표면 항원 CD33 (Siglec-3, gp67)은 시알산 결합 면역글로불린 유사 렉틴(Siglec) 패밀리에 속하는 1형 트랜스멤브레인 수용체입니다. CD33 유전자에 의해 암호화됩니다.
• CD33은 알파-2,3 및 알파-2,6 연결된 시알산을 함유한 당쇄(glycans)를 선호적으로 인식하고 결합하여 세포 간 상호작용을 매개하고 면역 세포를 휴지 상태로 유지합니다. 관련 문헌: PMID:10611343, PMID:11320212, PMID:15597323, PMID:7718872
• 리간드 결합 시(예: C1q 또는 시알산화 당단백질), 세포질 꼬리의 면역수용체 티로신 기반 억제 모티프(ITIMs)는 LCK와 같은 Src 유사 키나제에 의해 인산화되어 단백질 티로신 인산화효소인 PTPN6/SHP-1 및 PTPN11/SHP-2의 도킹 부위를 형성합니다. 관련 문헌: PMID:10887109, PMID:28325905, PMID:10206955, PMID:10556798
• 모집된 인산화효소는 하류 신호 분자를 탈인산화하며, 그 중 하나의 억제 효과는 포스파티딜이노시톨 3-키나제/PI3K에 의존합니다. 관련 문헌: PMID:15597323
• CD33은 주로 단핵구 및 골수 계열 세포(단핵구, 대식세포, 과립구)의 표면과 뇌의 미세아교세포에서 발현됩니다.
• 세포 내적으로 CD33은 세포막과 퍼옥시좀(peroxisomes)에 국재합니다. 신호 펩타이드, 면역글로불린 유사 V형 도메인 및 트랜스멤브레인 나선을 포함합니다.
• 이 단백질은 대체 스플라이싱 및 인산화, N-결합 당화, 이황화 결합 형성을 포함한 번역 후 변형을 겪습니다. 예상 분자량은 약 39.8 kDa이지만, 차등적인 당화 및 이소형 발현으로 인해 여러 밴드(25 kDa, 33 kDa, 39 kDa)가 관찰됩니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 면역원(아미노산 18-259)은 인간 CD33의 전체 세포외 도메인을 포함하므로 수용체의 자연적인 세포 표면 형태 인식에 유리합니다.
• 유세포 분석의 경우 최적 농도를 결정하기 위해 항체를 적정(titrate)하십시오. 양성 대조군으로 알려진 CD33 양성 세포주(예: THP-1, U937) 또는 인간 말초혈 단핵구를 사용하십시오.
• 접합체는 2차 시약 없이 직접 검출을 가능하게 합니다. 형광 강도를 유지하려면 항체를 빛으로부터 보호하고 반복적인 냉동-해동을 피하십시오.
• 세포 내 염색이 필요한 경우(예: 퍼옥시좀 국재화 확인), 형광체와 호환되는 고정 및 투과화 프로토콜을 고려하십시오.

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