Rabbit anti-Human CD62E/E-Selectin Monoclonal Antibody for Flow Cytometry - P16581

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: E-Selectin 기능 및 국소화

• E-selectin은 CD62E, ELAM-1 또는 LECAM2로도 알려져 있으며, SELE 유전자에 의해 암호화되는 세포 표면 당단백질입니다. 이는 N-말단 렉틴 도메인, EGF 유사 도메인 및 여러 스시(보체 조절 단백질) 반복 서열로 특징지어지는 셀렉틴 접착 분자 패밀리에 속합니다.
• E-selectin의 주요 기능은 염증 반응 동안 활성화된 내피세포에 대한 백혈구의 부착을 매개하는 것입니다. 호중구, 단핵구 및 기억 T 세포 표면의 시알릴-루이스 X(sialyl-Lewis X)와 같은 특정 탄수화물 리간드를 인식하고 결합합니다.
• E-selectin은 구성적으로 발현되지 않으며, 종양 괴사 인자 알파(TNF-α) 및 인터루킨-1(IL-1)과 같은 사이토카인에 의해 전사가 유도됩니다. 이러한 엄격하게 조절된 발현은 손상이나 감염 부위에서 신속하고 일시적인 부착 반응을 보장합니다.
• 면역 감시 기능 외에도, E-selectin은 모세관 형성(morphogenesis)에 관여하는 것으로 밝혀졌으며, 이는 혈관신생 및 혈관 재구성에서의 기능을 시사합니다.
• 이 단백질은 리간드 결합 도메인이 세포 표면에 노출된 상태로 세포막에 고정된 제1형 막관통 당단백질입니다. 세포 외 영역은 이황화 결합 및 칼슘 결합 부위에 의해 안정화된 여러 도메인을 포함합니다.
• 주요 구조적 특징으로는 칼슘 의존성 탄수화물 인식을 담당하는 N-말단 C-형 렉틴 도메인, 그 뒤를 따르는 단일 상피세포 성장 인자(EGF) 유사 도메인, 6개의 짧은 컨센서스 반복(스시 도메인)이 포함됩니다. 짧은 세포질 꼬리는 세포골격 및 세포 내 신호 전달 분자와 상호작용할 수 있습니다.
• E-selectin은 적절한 폴딩과 리간드 결합 활성에 필수적인 N-글리코실화 및 사슬 내 이황화 결합 형성을 포함한 번역 후 변형을 겪습니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 이 항체는 인간 E-selectin의 세포 외 영역(아미노산 22-230)에 해당하는 면역원을 사용하여 개발되었으며, 여기에는 렉틴 및 EGF 유사 도메인이 포함됩니다. 이러한 설계는 원래의 입체 구조에서 접근 가능한 에피토프를 선호하므로, 해당 클론은 유세포 분석에 적합합니다.
• 유세포 분석 염색의 경우, 활성화된 내피세포나 백혈구 집단에서 준비된 단일 세포 현탁액을 사용하십시오. 특정 모델 시스템에 대한 최적의 신호 대 잡음비를 결정하기 위해 항체의 적정(titration)을 고려하십시오.
• 특이성을 보장하기 위해 적절한 등형 대조구(isotype controls)와 생/사(live/dead) 구분을 포함하십시오. 정지 상태의 세포에서는 E-selectin 발현이 낮을 수 있으므로, 표적 발현을 상향 조절하기 위해 사이토카인 자극(예: TNF-α 처리)을 권장합니다.
• 접합체는 일반적인 적색/주황색 레이저 라인(예: 561 nm 또는 594 nm)과 호환되며 다색 패널의 다른 형광체와 결합하여 사용할 수 있습니다. 장비에서 스펙트럼 중첩 보상 설정을 검증하십시오.
• 형광체의 안정성을 유지하기 위해 접합된 항체를 항상 빛으로부터 보호하고 반복적인 냉동-해동 동결을 피하십시오.

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