세포 내 유세포 분석용 토끼 항-인간 사이토케라틴 8 단일클론 항체 - P05787

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: 사이토케라틴 8 기능 및 국소화

• 케라틴 8 (K8/CK8)은 KRT8 유전자에 의해 암호화되는 II형 케라틴 중간 필라멘트 단백질로, 단순 상피 세포에서 I형 파트너인 KRT18과 필수 이중중합체를 형성합니다 (PubMed:26823019).
  관련 문헌: PMID:26823019
• KRT8은 상피에 기계적 안정성과 탄력을 제공하며, 세포자멸사(apoptosis)와 같은 비기계적 스트레스로부터 세포를 보호합니다 (유사성에 의함).
• ARHGEF40 매개 액틴 응력 섬유 형성 및 장력 유도 응력 섬유 강화에 필요합니다 (PubMed:26823019).
  관련 문헌: PMID:26823019
• 횡문근에서 KRT8과 KRT19는 코스타메어(costameres)에서 수축 장치를 디스트로핀(dystrophin)과 연결할 수 있습니다 (PubMed:16000376).
  관련 문헌: PMID:16000376
• 세포 내 국소화는 주로 세포질 골격(cytoskeleton)에 위치하지만, 핵질(nucleoplasm)과 핵 기질(nuclear matrix)에서도 검출됩니다.
• 번역 후 수정에는 아세틸화, 인산화, 메틸화, 유비퀴틴화 및 당화가 포함되며, 이는 조립 및 기능을 조절합니다.
• 조직 특이성: 단순 상피(예: 잇몸 점막, 경구개) 및 코스타메어의 근육 섬유에서 발현됩니다.
• 임상적 관련성: 질병 변이 및 숙주-바이러스 상호작용과 관련이 있으며, 병리학적 역할을 강조합니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 세포 내 유세포 분석의 경우, 항체가 세포질 케라틴 네트워크에 접근할 수 있도록 최적화된 프로토콜(예: 4% PFA 처리 후 0.1% Triton X-100 또는 사포닌 기반 완충액 사용)을 사용하여 세포를 고정하고 투과화(permeabilize)하십시오.
• 최적의 염색 농도를 결정하기 위해 표지 항체를 적정(titrate)하십시오. 일반적인 시작 희석 배율은 1:50에서 1:200 사이이지만, 세포 유형에 따라 달라질 수 있습니다.
• 게이팅 임계값을 설정하고 KRT8 염색의 특이성을 확인하기 위해 적절한 아이소타입 대조 항체를 사용하십시오.
• HeLa 세포 또는 높은 KRT8 발현을 나타내는 기타 단순 상피 세포주(예: MCF-7)는 양성 대조군으로 사용할 수 있습니다. 가능한 경우 녹아웃(knockout) 또는 녹다운(knockdown) 세포를 음성 대조군으로 사용하는 것이 좋습니다.
• 염색 및 데이터 획득 중 형광체의 광표백(photobleaching)을 방지하기 위해 항체를 장시간 빛에 노출되지 않도록 보호하십시오.
• 면역원은 거의 전장(full-length) KRT8 (aa 1-483)에 걸쳐 있으므로, 이 항체는 원래의 입체 구조(native conformation)를 인식할 가능성이 높습니다. 그러나 다른 애플리케이션(예: WB, IHC)에 대한 검증은 제공되지 않았으므로 독립적으로 확인해야 합니다.

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