Rabbit anti-Human IL-1β mAb for Intracellular Flow Cytometry - P01584

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: 인터루킨-1 베타 기능 및 국재화

• IL-1β(인터루킨-1 베타, Catabolin으로도 알려짐)은 강력한 전염증성 사이토카인이며 인터루킨-1 패밀리의 일원입니다. 인간에서는 IL1B 유전자(Gene ID: 3553)에 의해 암호화됩니다.
• IL-1β는 핵심 내인성 발열 물질로 작용하여 프로스타글란딘 합성, 호중구 유입 및 활성화, T세포 및 B세포 자극, 그리고 섬유아세포 증식 및 콜라겐 생성을 유도합니다. 관련 참고문헌: PMID:3920526
• Th17 분화를 촉진하고 IL-12와 상승 작용하여 Th1 세포에서 IFN-γ 합성을 유도합니다. 관련 참고문헌: PMID:10653850
• IL-1β는 TNF 및 IL-6와 상승 작용하여 VEGF 생성을 유도함으로써 혈관 신생에 기여합니다. 관련 참고문헌: PMID:12794819
• 인플라마솜(inflammasome) 활성화 및 파이로프토시스(pyroptosis) 후에 성숙한 IL-1β는 가스더민-D(GSDMD) 기공을 통해 방출되며, 세포 사망 하류의 염증 전달에서 중요한 역할을 합니다. 관련 참고문헌: PMID:33377178 PMID:33883744
• 연쇄상구균(Streptococcus pyogenes) 피부 감염 동안 IL-1β는 센서로 작용합니다. 세균성 프로테아제인 SpeB에 의해 절단 및 활성화되어, 세균 성장을 억제하는 염증 반응을 유발합니다. 관련 참고문헌: PMID:28331908
• 세포 내적으로 IL-1β는 세포질, 리소좀에 존재하며, 엑소좀을 포함하여 세포 외로 분비됩니다.
• 주로 활성화된 단핵구 및 대식세포에서 단백질 수준으로 발현됩니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 면역원은 성숙한 IL-1β(aa 117-269)에 해당하므로, 이 항체는 전구체(pro-) 및 절단된 형태(cleaved forms)를 모두 검출할 수 있습니다. 세포 내 유세포 분석의 경우, 완전한 고정 및 투과화(permeabilization)를 보장하십시오.
• 항체 진입을 허용하면서 에피토프 접근성을 유지할 수 있도록 투과화 조건(예: 사포닌 또는 메탄올)을 최적화하십시오. 필요한 경우 생존 염색약(viability dye)을 포함하여 사멸 세포를 제외하십시오.
• 알려진 인플라마솜 활성제(예: LPS + ATP)로 자극하고 비자극 대조군과 비교하여 특정 세포 문맥에서 항체를 검증하십시오.
• 투과화된 세포에서 특이 신호와 배경 신호의 균형을 맞추어 최적의 항체 농도를 결정하기 위해 적정(titration) 실험을 수행하십시오.
• 이 항체는 인간 IL-1β에 특이적입니다. 면역원 서열에 근거하여 마우스 또는 랫트 IL-1β와의 교차 반응성은 예상되지 않지만, 다른 종에 사용할 경우 검증되어야 합니다.

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