Rabbit anti-Human TNF-α Monoclonal Antibody for Intracellular Flow Cytometry - P01375

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: 종양 괴사 인자(Tumor necrosis factor)의 기능 및 국재화

• 종양 괴사 인자 알파(TNF-α)는 카헥틴(cachectin) 또는 TNFSF2라고도 하며, TNF 슈퍼패밀리의 주요 사이토카인입니다. 막관통형(transmembrane) 및 가용형(soluble) 형태로 존재합니다. 가용형은 막결합 전구체의 단백질 분해 절단(proteolytic cleavage)에서 유래됩니다.
• TNF-α는 수용체 TNFRSF1A/TNFR1 및 TNFRSF1B/TNFBR에 결합하여 세포자멸사(apoptosis), 세포 생존, 염증 및 면역 조절로 이어지는 신호 전달 경로를 트리거합니다. 강력한 발열 유발 물질(pyrogen)으로 작용하여 직접적으로 또는 IL-1 유도를 통해 열을 유발하며, 악액질(cachexia) 유발에 관여합니다.
• 류마티스 관절염에서 TNF-α는 단백질 인산화효소 1(PP1)을 상향 조절하여 조절 T 세포(regulatory T-cell) 기능을 손상시킵니다. PP1은 FOXP3의 Ser-418을 인산화 제거(dephosphorylates)하여 FOXP3를 비활성화하고 Treg 세포의 기능적 결함을 유발합니다. 관련 참고문헌: PMID:23396208
• TNF-α는 항암 면역 반응에서 세포 사망의 매개체로 작용합니다. 이는 방광암 세포에서 BCG 자극 호중구 및 DIABLO/SMAC 유사체(mimetics)와의 역할에서 예시됩니다. 관련 참고문헌: PMID:16829952, PMID:22517918, PMID:23396208
• TNF-α는 IL1B 및 IL6와 협동적으로 VEGF 생성을 유도하여 혈관 신생을 촉진합니다. 관련 참고문헌: PMID:12794819
• TNF-α는 인슐린 유도 IRS1 티로신 인산화 및 포도당 흡수를 억제하여 지방세포에서 인슐린 저항성을 유도합니다. 이는 부분적으로 GKAP42 단백질 분해를 통해 이루어지며, 파골세포 분화(osteoclastogenesis)를 촉진하여 골 흡수에 기여합니다.
• 세포 내적으로 TNF-α는 세포막, 세포 내 막에 위치하며 분비됩니다. TNF 세포 내 도메인(ICD) 형태는 수지상 세포에서 IL12 생성을 추가로 유도할 수 있습니다.
• 번역 후 수정(post-translational modifications)에는 이황화 결합 형성, 당화(glycosylation), 미리스토일화(myristoylation) 및 인산화가 포함되며, 이는 안정성과 활성에 중요합니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 면역원(아미노산 77-233)은 N-말단 막관통 도메인이 없는 TNF-α의 성숙한 가용형 형태에 해당합니다. 이 설계는 분비형 및 세포 내 전구체 형태 모두의 검출에 유리할 수 있습니다.
• 접합체는 유세포 분석에 최적화되어 있습니다. 세포 내 염색의 경우 사이토카인에 대해 검증된 고정/투과화(fixation/permeabilization) 프로토콜을 사용하는 것이 좋습니다. 적절한 아이소타입 대조군을 포함하고 자극된 샘플과 비자극된 샘플의 염색을 확인하십시오.
• 염색 지수는 세포 유형 및 활성화 상태에 따라 달라질 수 있으므로, 특정 실험 설정에 대한 최적의 항체 농도를 결정하기 위해 적정(titration) 실험을 수행하십시오.

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