Rabbit anti-Human/Monkey CD45 Monoclonal Antibody for Flow Cytometry - P08575

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: CD45 기능 및 국소화

• PTPRC 유전자에 의해 암호화되는 수용체형 티로신-단백질 인산분해효소 C (CD45)는 백혈구 공통 항원(L-CA) 및 T200로도 알려져 있습니다. 대안 스플라이싱(Alternative splicing)으로 인해 여러 이소형이 존재합니다.
• 항원 수용체를 통한 T세포 활성화에 필수적입니다. 첫 번째 PTPase 도메인은 효소 활성을 가지며, 두 번째 도메인은 기질 특이성을 조절합니다. T세포 활성화 시 CD45는 SKAP1 및 FYN을 모집하고 인산기를 제거하며, LYN 활성을 조절합니다. 관련 참고문헌: PMID:35767951
• 인간 거대세포바이러스(Cytomegalovirus) 단백질 UL11의 수용체로 작용하여, 바이러스가 T세포에 결합하고 T세포 증식 및 신호 전달을 방해하는 것을 매개합니다.
• 세포막, 막 라프트(membrane rafts), 면역 시냅스(immunological synapse)에 국소화되어 항원 인식 및 신호 전달 부위에 위치합니다.
• 이소형 1–3, 5, 7은 흉선세포(Thymocytes)에서 검출되는 반면, 이소형 4, 6, 8은 검출되지 않아 조직 특이적 발현 패턴을 나타냅니다.
• 당화(Glycosylation) 및 인산화를 통해 번역 후 변형되며, 가수분해효소(hydrolase), 단백질 인산분해효소, 당단백질, 숙주-바이러스 상호작용 키워드로 분류됩니다.
• 단백질-티로신 인산분해효소 과(family), 수용체 클래스 1/6 아과(subfamily)에 속하며 면역 세포의 핵심 신호 허브로 작용합니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 면역원은 인간 CD45의 아미노산 26–577(세포 외 영역 포함)로 구성되므로, 이 항체는 천연 세포 외 항원결정기(epitope)를 인식할 것으로 예상됩니다.
• 유세포 분석의 경우, 특정 세포 유형 및 기기 설정에 최적화된 농도를 결정하기 위해 항체를 적정(Titrate)하고 적절한 등형 대조군(Isotype control)을 사용하십시오.
• CD45 양성 세포(예: 인간 말초혈액 단핵세포(PBMCs), Jurkat) 및 음성 세포(예: 적혈구)에서 염색을 검증하십시오.
• CD45는 백혈구에 고발현되므로, 비특이적 결합을 최소화하기 위해 Fc 수용체 차단을 고려하십시오.
• 접합체는 일반적인 방출 필터(예: 614/20 nm)와 호환되며, 다색 패널에서 적절한 보상(Compensation)을 보장하십시오.
• 고정 및 투과 처리(Permeabilization)는 CD45 항원결정기 인식을 변경할 수 있으므로, 실험 프로토콜에 표면 염색만으로 충분한지 테스트하십시오.
• 접합체의 완전성을 유지하기 위해 희석하지 않은 항체를 2–8°C에서 빛을 차단하여 보관하고 반복적인 냉동-해동을 피하십시오.

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