세포 내 유세포 분석용 Rabbit anti-Human/Monkey Ki67 단일클론 항체 - P46013

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: Ki67 기능 및 위치

• 증식 표지 단백질 Ki-67 (항원 KI-67, MKI67)은 유사 분열 염색체 표면과 결합하는 큰 핵 단백질(358.7 kDa)로, 초기 유사 분열 동안 염색체 반발체 역할을 하고 후기 유사 분열 동안 끌어당기는 역할을 하는 이중 기능을 합니다.
• 초기 유사 분열에서 Ki-67는 염색체 위에 확장된 브러시 구조를 형성하여 입체적 및 정전기적 전하 장벽을 통해 염색체가 단일 염색질 덩어리로 붕괴되는 것을 방지함으로써 독립적인 염색체 운동성을 가능하게 합니다. 관련 참고문헌: PMID:27362226
• 유사 분열 후기 동안, Ki-67의 탈인산화와 보존된 염기성 패치의 노출은 염색체 표면에서 RNA 의존적 액체-액체 상 분리를 유도하여, 이를 염색체 끌어당기는 물질로 전환시켜 군집화를 촉진하고 미래의 핵 공간에서 세포질 입체를 배제합니다. 관련 참고문헌: PMID:32879492, PMID:39153474
• Ki-67는 DNA에 결합하며, 특히 초코일 및 AT가 풍부한 DNA를 선호하고, 후기 동안 성숙하지 않은 리보솜 RNA에도 결합하여 상 분리에 기여합니다. 관련 참고문헌: PMID:10878551, PMID:28935370
• 이 단백질은 간기 동안 염색체, 핵 및 특히 뚜렷하게 인지질에 위치합니다.
• 인산화, 아세틸화 및 아이소펩타이드 결합 형성을 포함한 다양한 번역 후 변형을 거치며, 선택적 스플라이싱과 유비쿼티네이션의 대상이 됩니다 (키워드: 아세틸화, 선택적 스플라이싱, 인산단백질, 유비쿼틴 결합).
• 선택적 스플라이싱은 MKI67의 여러 이소형을 생성하여 기능적 다양성에 기여합니다.

실험 지도 및 기술 팁

• 면역원은 인간 Ki67의 잔기 2271–2370에 걸친 합성 펩타이드로, 세포 내 검출을 위한 에피토프 특이성을 보장합니다.
• 세포 내 유세포 분석을 위해서는, 에피토프 무결성을 유지하면서 항체가 핵 Ki-67에 접근할 수 있도록 고정 및 투과 조건을 철저히 최적화하십시오.
• 사용하는 세포 유형 및 염색 프로토콜에 대한 최적 농도를 결정하기 위해 접합체의 농도를 적정하는 것을 고려하십시오.
• 항체를 증식하는 인간 및 원숭이 세포에서 검증하고, 적절한 동형 대조군 및 비자극 또는 G0 정지 세포를 음성 대조군으로 사용하십시오.
• 형광 염료를 보호하기 위해 장시간 빛에 노출되는 것을 피하고, 접합 항체 보관 및 취급에 대한 표준 관행을 따르십시오.

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