Rabbit anti-Mouse CD22 Monoclonal Antibody for IF-P and FC - P35329

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: CD22 기능 및 국소화

• CD22는 B세포 수용체이자 B세포에서 가장 고도로 발현되는 시알산 결합 면역글로불린 유사 렉틴(siglec)으로, 분화, 항원 제시 및 골수로의 이동(trafficking)에서 중요한 역할을 합니다 (PubMed:7533044, PubMed:9016707). 관련 참고문헌: PMID:7533044, PMID:9016707
• 이 단백질은 시스(cis) 구성에서 CD22 자체, CD45 및 IgM와 같은 표면 분자의 α2,6 연결 시알산 잔기에 결합하며, 트랜스(trans) 상호작용을 통해 접착 분자로 작용할 수도 있습니다.
• CD22는 B세포의 억제성 공동 수용체로 기능하며, 칼슘 동원 및 세포 활성화를 억제하여 B세포 수용체(BCR) 신호전달을 음성 조절합니다 (PubMed:9016707). 관련 참고문헌: PMID:9016707
• BCR 결합 시, CD22의 면역수용체 티로신 기반 억제 모티프(ITIM)는 Src 키나아제 LYN에 의해 인산화되어 단백질 티로신 인산가수분해효소 PTPN6 (SHP-1)의 모집 및 BCR 신호전달의 약화를 유도합니다.
• CD22 매개 음성 신호가 충분히 강하면 B세포의 세포자멸사(apoptosis)를 유도할 수 있습니다.
• CD22는 세포막에 국소화되며 B림프구에 특이적으로 발현됩니다.
• 이 단백질은 대체 스플라이싱을 거치며, 당단백질, 인산단백질, 이황화 결합 및 면역글로불린 도메인 함유 단백질을 포함하는 키워드로 분류됩니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 이 접합 항체는 면역형광법(IF-P) 및 유세포분석(FC)에서 직접 검출을 위해 설계되었습니다. IF-P의 경우, 막 국소화를 보존하기 위해 고정 및 투과화 단계를 최적화하는 것이 좋습니다. FC의 경우 권장 시작 희석 비율은 일반적으로 1:50에서 1:200 사이이지만, 최종 사용자는 특정 실험 시스템에 맞게 적정(titrate)해야 합니다.
• 면역원은 세포외 도메인(아미노산 22-151)에 해당하며 마우스 CD22의 N-말단 영역을 타겟팅합니다. 이 영역은 시알산 결합에 관여하는 V-set Ig 유사 도메인을 포함하므로, 이 항체는 수용체의 고유 형태(native conformation)를 인식할 수 있습니다.
• 가능한 경우 CD22 녹아웃(knockout) 또는 녹다운(knockdown) 모델을 사용하여 특이성을 검증하고, 분석에서 비특이적 결합이 최소화되는지 확인하십시오.
• CD22는 B세포 특이적 마커이므로, 샘플에 적절한 세포 집단이 존재하는지 확인하십시오. 유세포분석의 경우 적절한 아이소타입 대조군(isotype controls)과 Fc 수용체 차단 단계를 포함하십시오.

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