Rabbit anti-Mouse CD22 Monoclonal Antibody for IF-P and FC - P35329

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: CD22 기능 및 국소화

• CD22 (Siglec-2, BL-CAM)는 B세포에서 가장 고도로 발현되는 시알산 결합 면역글로불린 유사 렉틴(siglec)으로, B세포 분화, 항원 제시 및 골수로의 귀소(homing)에 중요한 역할을 합니다. 관련 참고문헌: PMID:7533044 PMID:9016707
• 이 단백질은 억제성 공동 수용체(co-receptor)로 기능하며, LYN에 의해 ITIM 모티프가 인산화되면 티로신 인산화효소 PTPN6/SHP-1을 모집하여 B세포 수용체(BCR) 신호전달을 약화시키고, 이로 인해 칼슘 유동 및 세포 활성화가 감소됩니다. 관련 참고문헌: PMID:9016707
• CD22는 자기 자신과 CD45 및 IgM과 같은 다른 표면 분자의 α2,6 연결 시알산 잔기에 cis(세포 내) 방식으로 결합하며, 다른 세포의 리간드와의 trans(세포 간) 상호작용을 통해 세포 부착 분자로도 작용합니다.
• 이 단백질은 N말단 V-set Ig 도메인과 여러 C2-set Ig 반복 서열을 특징으로 하는 면역글로불린 유사 렉틴인 siglec 패밀리에 속하는 제1형 막통과 당단백질입니다.
• 대체 스플라이싱(alternative splicing)을 통해 여러 이소폼이 생성되며, 관찰된 분자량은 약 89, 93, 97 kDa로 보고된 전장 97 kDa 형태 및 잠재적 스플라이스 변이체와 일치합니다.
• CD22는 B림프구에 특이적으로 발현되며 세포막에 국재되어 세포 표면과 세포 내 소관(Compartment) 사이를 오갑니다.
• 번역 후 수정(post-translational modifications)에는 N-결합 당화, ITIM 및 ITIM 유사 모티프 내의 티로신 잔기 인산화, 이황화 결합 형성이 포함됩니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 면역원은 마우스 CD22의 세포 외 영역(aa 22-151)에서 유래되었으므로, 이 항체는 투과화되지 않은 세포(non-permeabilized cells)에서 노출된 표면 CD22를 검출하는 데 적합합니다.
• 유세포분석(FC)의 경우, 최적의 염색 농도를 결정하고 배경을 최소화하기 위해 관련 마우스 B세포주 또는 일차 비장세포(primary splenocytes)에서 항체의 적정(titration)을 고려하십시오.
• 파라핀 포함 조직(IF-P)에서의 면역형광 실험 시, 에피토프가 포르말린 고정에 의해 부분적으로 가려질 수 있으므로 항원 회수 조건을 최적화하고 적절한 대조군(예: CD22 음성 세포)을 포함하십시오.
• 접합된 염료는 표준 적색/주황색 검출 채널과 호환되며, 다른 형광체와 다중 염색(multiplexing)할 경우 스펙트럼 분리가 되도록 확인하십시오.
• CD22는 잘 검증된 B세포 마커입니다. 이 항체는 마우스 조직 내 B림프구 집단을 식별하는 데 사용할 수 있지만, 마우스 이외의 다른 종과의 교차 반응성은 테스트되지 않았습니다.

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