SARS-CoV-2 스파이크 S1 토끼 단일클론 항체 (WB, IF/ICC, ELISA용) - P0DTC2

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: SARS-CoV-2 스파이크 S1 기능 및 국소화

• 스파이크 당단백질(S)은 숙주 안지오텐신 전환 효소 2(ACE2) 수용체에 결합하여 바이러스 진입을 매개하며, 이는 감염 시작의 핵심 단계입니다. 관련 참고문헌: PMID:32142651 PMID:32155444 PMID:33607086
• 뉴로필린-1(NRP1)/NRP2, 아시알로글리코단백질 수용체 1(ASGR1), 인테그린과 같은 대체 수용체도 바이러스 진입을 촉진할 수 있으며, 이는 낮은 ACE2 수준을 발현하는 후각 상피세포에 대한 친화성에 기여할 수 있습니다. 관련 참고문헌: PMID:33082294 PMID:33082293 PMID:35150743 PMID:34837059
• S 단백질은 숙주 프로테아제에 의해 S1(수용체 결합) 및 S2(막 융합) 서브유닛으로 절단되며, TMPRSS2 또는 카텝신 L에 의한 S2' 부위의 절단은 융합 활성화에 필수적입니다. 관련 참고문헌: PMID:32142651 PMID:32703818 PMID:34159616 PMID:34561887
• 절단 후, S2 서브유닛은 융합 전 상태에서 융합 후 삼량체 헤어핀 구조로 급격한 입체 배열 변화를 겪으며, 이를 통해 바이러스 막과 세포 막을 밀착시켜 융합을 일으킵니다.
• 세포 내적으로 스파이크 단백질은 바이러스 입자 막, 숙주 소포체-골지체 중간기 관(ERGIC) 막, 숙주 세포 막에 국소화되며, 이는 수송 및 출아 과정을 반영합니다.
• S 단백질은 슈퍼항원과 유사한 특성을 가지며 바이러스 면역 회피에 관여하여, 숙주 선천성 면역 반응을 억제하고 테더린(tetherin)과 같은 제한 인자를 차단합니다.

실험 가이드 및 기술적 팁

• 면역원 설계: 이 항체는 S1 서브유닛(YP_009724390.1) 내 아미노산 200-300에 걸친 합성 펩타이드(수용체 결합 도메인과 중복되는 영역)를 사용하여 생성되었습니다. 이 에피토프는 많은 SARS-CoV-2 분리주에서 보존되어 있어 광범위한 반응성을 시사합니다.
• 웨스턴 블로팅(WB)의 경우, 전장 스파이크 단백질의 예상 분자량은 약 141 kDa이지만, 샘플 준비 방법에 따라 S1 절단 산물(약 80 kDa)이 검출될 수 있습니다. SARS-CoV-2 감염 세포의 용해물 또는 재조합 S1 단백질을 사용하여 검증하십시오.
• 면역형광법(IF/ICC)의 경우, 감염 세포 내 세포 내 스파이크 단백질을 검출하기 위해 투과화(permeabilization) 프로토콜을 고려하십시오. 소기관 마커와의 이중 염색은 세포 내 국소화 연구에 도움이 될 수 있습니다.
• ELISA 응용의 경우, 이 항체는 재조합 S1 단백질 정량 또는 바이러스 입자 정량을 위한 포효 또는 검출 시약으로 사용할 수 있습니다. 관련 SARS-CoV-2 변이에 대한 역가 및 교차 반응성을 확인해야 합니다.
• 모든 연구용 항체와 마찬가지로, 각 분석 및 샘플 유형에 대해 최적의 작업 희석 배율을 경험적으로 결정해야 합니다.

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