WB, IP, ELISA용 Smad5 토끼 단일클론 항체 - Q99717

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: Smad5 기능과 세포 내 위치

• SMAD5(Mothers against decapentaplegic homolog 5)는 JV5-1 또는 MADH5로도 알려져 있으며, TGF-β 수퍼패밀리 리간드로부터 신호를 전달하는 SMAD 패밀리 전사인자의 일원입니다.
• 골형성단백질(BMP) 자극을 받으면 SMAD5는 I형 BMP 수용체에 의해 인산화되어 SMAD4와 결합합니다. 생성된 복합체는 핵으로 이동하여 Smad 결합 요소(SBE)에 결합하여 유전자 발현을 조절합니다. 관련 참고문헌: PMID:9442019 PMID:33510867
• SMAD5는 배아 발생, 세포 분화, 혈관신생 및 조직 항상성에 필수적입니다. 관련 참고문헌: PMID:12064918 PMID:16516194
• 인산화되지 않은 상태의 SMAD5는 헥소키나아제 1(HK1)과 상호작용하여 미토콘드리아 호흡과 해당과정을 강화함으로써 세포질에서 에너지 대사 기능을 수행합니다. 관련 참고문헌: PMID:28675158
• 아세포 내 위치 연구에 따르면 SMAD5는 세포질, 핵, 미토콘드리아에서 발견되며, 이는 다양한 신호전달 및 대사 기능을 반영합니다.
• SMAD5는 인간의 모든 조직에 널리 발현됩니다.
• 번역 후 변형으로는 인산화와 아세틸화가 있으며, SMAD 단백질의 특징인 아연 결합 도메인도 포함하고 있습니다.

실험 가이드 및 기술 팁

• 면역원은 인간 SMAD5의 200~300 아미노산 서열에 해당하는 합성 펩티드였습니다. 생성된 토끼 단일클론 항체는 총 SMAD5 단백질을 인식할 것으로 예상되며, 인산화 에피토프가 이 영역 내에 있지 않은 한 인산화형과 비인산화형을 구분하지 못할 수 있습니다.
• 웨스턴 블롯의 경우 약 52 kDa 위치에서 밴드가 예상됩니다. 인산화된 SMAD5의 이동 변화를 관찰하거나 경로 활성화를 확인하려면 세포를 BMP 리간드(예: BMP2/BMP4)로 처리하는 것을 고려하세요.
• 이 항체는 인간 및 생쥐 용해물에서 내인성 SMAD5의 면역침전에 적합합니다; 공동면역침전 연구의 경우 용해 및 세척 조건을 최적화하는 것을 권장합니다.
• ELISA에서 이 항체는 펩티드 기반 또는 샌드위치 ELISA 형식에서 SMAD5 검출에 사용할 수 있습니다. 재조합 SMAD5 단백질 또는 세포 용해물로 검증하세요.
• 모든 항체와 마찬가지로 적절한 양성 대조군(예: BMP 처리된 HeLa, HEK293)과 음성 대조군(예: siRNA 매개 넉다운)을 사용하여 실험 시스템에서 특이성을 검증하세요.

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