대칭 디메틸-히스톤 H4-R3 (P62805) 토끼 다클론 항체 (WB, IHC, IF/ICC, ELISA용)

주요 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: 히스톤 H4의 기능과 위치

• 히스톤 H4는 염색질의 기본 단위인 뉴클레오좀을 구성하는 코어 히스톤 중 하나입니다. 히스톤 H2A, H2B, H3와 함께 8량체 히스톤을 형성하여 약 147bp의 DNA를 감아 고밀도로 압축하고 유전 물질에 대한 접근을 조절합니다.
• 이러한 DNA 패키징은 전사, 복제, 수리 및 염색체 안정성 유지를 포함한 DNA 주형 기반 과정에 필수적입니다. 염색질 구조의 동적 조절은 흔히 "히스톤 코드"라고 불리는 히스톤의 번역 후 변형(PTM)에 의해 조절됩니다.
• 히스톤 H4는 주로 핵에 위치하며 염색체와 결합되어 있습니다. 정자 형성 시 아세틸화와 같은 특정 변형이 발생하면 핵에 국소적으로 위치할 수 있습니다.
• H4는 아세틸화, 메틸화, 인산화, 시트룰린화 및 다양한 아실화를 포함한 다양한 번역 후 변형을 받습니다. 이러한 변형은 여러 잔기에서 발생하며 뚜렷한 하류 이벤트를 조절합니다.
• 아르기닌 3의 대칭 디메틸화(H4R3me2s)는 단백질 아르기닌 메틸트랜스퍼라제 PRMT5 및 PRMT7에 의해 촉매됩니다. 이 변형은 전사 조절에 관여하며 히스톤 코드를 구성하는 많은 표지 중 하나입니다. 관련 참고문헌: UniProt P62805.

실험 가이드 및 기술 팁

• 본 항체는 Arg3에 대칭 디메틸화가 발생한 인간 히스톤 H4(NP_003529.1)의 아미노산 1-100번을 포함하는 합성 펩티드를 면역원으로 생산되었습니다. 면역원 설계 상 변형 형태에 대한 특이성이 예상되지만, 비변형 형태나 다른 변형 형태와의 교차 반응성은 평가해야 합니다.
• 웨스턴 블로팅(WB)의 경우 히스톤 H4의 예상 분자량은 약 11kDa입니다. 양성 대조군으로 핵 추출물이나 히스톤 농축 표본을 사용하는 것을 권장하며, 로딩 전에 샘플을 환원시키고 변성시켜야 합니다.
• 면역조직화학(IHC) 및 면역형광(IF/ICC)에서는 특히 포르말린 고정 파라핀 포매 조직의 경우 에피토프를 노출하기 위해 항원 회수가 필요할 수 있습니다. 여러 항원 회수 방법을 테스트해 보시기 바랍니다.
• 펩티드 경쟁 분석이나 메틸트랜스퍼라제 저해제 처리 세포와의 비교 등 적절한 대조군을 사용하여 항체 특이성을 검증해야 합니다.
• 히스톤 H4의 서열 보존성이 높기 때문에 광범위한 종에서 반응이 예측되지만, 사용하시는 특정 모델 시스템에서 반응성을 확인하시기 바랍니다.
• 각 적용 분야마다 희석 비율을 경험적으로 최적화해야 하며, 일반적인 시작 희석 비율은 히스톤 변형을 표적으로 하는 다클론 항체에 대한 기존 프로토콜에서 적용할 수 있습니다.

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